畜牧兽医学报

作者：顾小玉, 贾雪寅, 刘小惠, 于学祥, 李文涛, 何启盖

单位：1.华中农业大学动物医学院，武汉 430070；2.农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室，武汉 430070；3.农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室，武汉 430070；4.国家伪狂犬病参考实验室，武汉 430070；5.湖北江夏实验室，武汉 430200

关键词：猪伪狂犬病,gE蛋白,单链抗体

基金：国家生猪产业技术体系(CARS-35);湖北省自然科学基金(2024AFB172);国家重点研发计划(2024YFD1800500)

2011年以来，我国新流行的猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）变异毒株大大增加了该病毒抗体的检测工作量，阻断ELISA试剂盒的大量使用增加了对单克隆抗体的需求量，但杂交瘤细胞在传代过程中容易失去抗体分泌能力。本研究旨在基于单克隆抗体制备出具有良好结合活性、可在原核系统大量表达的单链抗体（scFV）。本研究将原核表达的PRV gE蛋白免疫小鼠，经细胞融合及筛选得到稳定分泌针对PRV gE蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，以阳性杂交瘤细胞的cDNA为模板扩增得到抗体可变区序列，将重链和轻链可变区序列由Linker连接得到scFv基因，克隆到pET-28a质粒进行原核表达，对得到的重组抗体进行鉴定。结果显示：本研究获得了一株特异性针对PRV gE蛋白的单克隆抗体7B7，以7B7杂交瘤细胞的cDNA为模板，成功制备了能够特异性与PRV gE蛋白反应的单链抗体，并且能够通过原核表达系统进行表达。本研究为猪伪狂犬病病毒新型检测方法的开发提供了基础。

来源：2026年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2026年第1期