畜牧兽医学报

作者：张熠帆, 韩笑, 张叶娜, 孔朋莉, 宋厚辉, 张晓峰, 王晓杜, 帅江冰

单位：1.浙江农林大学动物科技学院·动物医学院，杭州 311300；2.浙江省检验检疫科学技术研究院，杭州 310016；3.浙江大学动物科学学院，杭州 310058

关键词：禽痘病毒,微滴数字PCR,定量检测

基金：国家重点研发计划(2021YFF0602803);浙江省“尖兵”“领雁”研发攻关计划项目(2023C02022);浙江省“尖兵领雁+X”研发攻关计划(2024C01137)

旨在建立一种禽痘病毒（fowlpox virus，FWPV）微滴式数字聚合酶链式反应（digital droplet PCR，ddPCR）检测方法。本研究通过对反应体系优化，包括引物和探针浓度的优化、退火温度的优化等步骤，进行重复性、敏感性、特异性试验，建立了较为完整的ddPCR反应体系。本方法确定FWPV ddPCR反应体系最佳引物浓度为900 nmol·L-1，最佳探针浓度为200 nmol·L-1，且在55 ℃反应条件下，ddPCR检测结果最优；本方法与其他常见禽类病毒无交叉反应，特异性强；本方法重复性好，批间与批内变异系数均小于10%。本ddPCR方法最低检测限为2.37拷贝·反应-1。采用建立的ddPCR检测方法和行业标准（SN/T 1226—2015）检测方法对80份模拟样本进行检测，其中8份作为阴性，其余72份样品作为模拟感染样品，符合率为100%，比行业标准套式PCR方法符合率高出75%。在25份人工攻毒样本中，ddPCR对阳性样本的检出率达100%，行业标准套式PCR方法对阳性样本的检出率为33.3%。本方法的建立为检测禽及其肉制品中禽痘病毒提供了痕量精准检测方法，为降低禽痘对禽类养殖产业风险带来保障。

来源：2026年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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