国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:马可, 张磊, 郝飞, 谢星, 张珍珍, 邵国青, 陈蓉, 冯志新
单位:1.南京农业大学生命科学学院,南京 210095;2.江苏省农业科学院兽医研究所 农业农村部兽用生物制品工程重点实验室,南京 210014;3.兽用生物制品泰州,国泰技术创新中心,泰州 225300;4.南京农业大学动物医学院,南京 210095
关键词:纤溶酶原,组织型纤溶酶原激活剂,葡激酶,血栓,蛋白纯化
基金:江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(22)3029);国家自然科学基金面上项目(32273011);国家自然科学基金青年项目(31800160);江苏省科协青年托举工程项目(JSTJ-23-093)
旨在建立从猪血中提纯纤溶酶原的高效方法。通过赖氨酸亲和层析结合凝胶过滤层析,纯化猪血中的sPLG;同时,利用大肠杆菌重组表达猪组织型纤溶酶原激活剂(st-PA)和葡激酶(SAK),并通过包涵体提取对st-PA进行纯化、镍柱亲和层析结合凝胶过滤层析纯化SAK。通过检测纤溶酶特异性底物分解曲线、纤连蛋白降解试验以及体外猪血凝块溶解试验,评估本研究中制备的sPLG及激活剂SAK、st-PA的活性。结果发现,本研究建立的方法高效纯化了sPLG,每250 mL猪血浆可获得50 mg精纯的sPLG。制备的sPLG能被st-PA或SAK激活,分解纤溶酶特异性底物、降解纤连蛋白,并在体外溶解猪血凝块。综上,研究建立了高效制备高纯度sPLG、st-PA和SAK的方法,并通过st-PA和SAK验证了sPLG具备完整的纤溶酶原活性,为sPLG在猪病原入侵机制的研究提供了原材料。
来源:2026年第1期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部