畜牧兽医学报

作者：胡伯欣, 高程远, 刘从, 陈茹曼, 朱捷, 田树军

单位：1. 河北农业大学动物科技学院, 保定 071000；2. 北京京瓦农业科技创新中心, 北京 100206

关键词：绵羊,卵母细胞,小群培养

基金：河北农业产业技术体系(HBCT2024250203)

旨在优化绵羊卵母细胞小群(5枚/组)体外培养体系，改善其成熟质量及后续发育潜能。本研究通过设置不同培养体积(50 COCs/500 μL、5 COCs/500 μL、5 COCs/50 μL)及添加外源BMP15与GDF9蛋白(200 ng·mL-1)，评估颗粒细胞扩展指数及其相关HAS2基因表达、卵丘和卵母细胞凋亡相关基因(BAX、BCL2、C-Myc)表达、卵母细胞氧化还原稳态(GSH、ROS、GPX-1、GSR)及胚胎发育指标(卵裂率、囊胚率、囊胚平均细胞数)，并进一步优化体外成熟培养时长(18 h、21 h、24 h)，确立优化方案。结果表明，添加BMP15和GDF9显著提升卵丘扩展指数(P < 0.01)，上调HAS2基因表达，改善氧化还原稳态(GSH水平升高，ROS降低)；500 μL培养液结合21 h成熟方案使小群培养卵母细胞体外受精后的48 h卵裂率达到70.23%±2.78%及囊胚率35.33%±1.53%，而21 hIVM组较24 h IVM组BAX表达量和BAX/BCL2比值显著降低。5 COCs /500 μL小群培养效果优于5 COCs/50 μL，联合添加BMP15和GDF9蛋白可降低细胞凋亡并提升胞内氧化还原能力，体外成熟时长由24 h缩短至21 h可通过降低细胞凋亡并促进囊胚OCT4、CCNB1基因表达并且提高囊胚平均细胞数。

来源：2025年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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