畜牧兽医学报

作者：张帅, 徐景, 杨培鸿, 郭益文, 胡德宝, 李新, 丁向彬, 郭宏, 张林林

单位：天津农学院动物科学与动物医学学院 天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室, 天津 300384

关键词：牛,骨骼肌卫星细胞,PFN1,成肌分化,PI3K/AKT/mTOR

基金：天津市畜禽分子育种与生物技术重点实验室开放课题基金(XM202502)；国家自然科学基金青年基金(31902151)

旨在探究PFN1通过与PTEN互作对牛骨骼肌卫星细胞(bovine skeletal muscle satellite cells, BSMSCs)成肌分化的影响。本试验将小片段干扰RNA(si-RNA)与过表达质粒分别转染到胎牛腿肌剥离的原代骨骼肌卫星细胞中，每个处理设计3个生物学重复。利用光学显微镜观察经过不同处理细胞分化的情况，在分化期的特定时间点收取细胞RNA与蛋白样品，分别利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)以及蛋白免疫印迹(Western blot)进行分析。试验结果显示：通过光学显微镜观察发现，干扰PFN1后牛骨骼肌卫星细胞可以形成更多粗大的肌管；qRT-PCR和Western blot证实，细胞分化标志基因MyHC表达量显著增加；而过表达PFN1后牛骨骼肌卫星细胞形成的肌管较细、量少；qRT-PCR和Western blot证实，MyHC表达量显著降低。通过Co-IP试验证实PFN1可以与PTEN互作，过表达PFN1可显著提升PTEN蛋白水平。在光学显微镜下观察发现，干扰PTEN后牛骨骼肌卫星细胞形成的肌管很少；qRT-PCR和Western blot试验证实，MyHC、MyOG在mRNA水平表达量显著增加，MyHC在蛋白水平显著降低；PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白表达量显著下调但通路最终关键作用蛋白p-mTOR显著增加。干扰PFN1后PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白表达量都显著增加。过表达PFN1后PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白显著下调。PFN1通过与PTEN互作抑制PI3K/AKT/mTOR通路活性，进而负调控BSMSCs成肌分化。本研究为肌肉发育的分子调控网络提供了新见解。

来源：2025年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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