畜牧兽医学报

作者：孙心如, 武文清, 罗亚娟, 谢锐, 彭长江, 华琳, 吴斌, 彭忠

单位：1. 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室, 武汉 430070；2. 生猪健康养殖协同创新中心, 武汉 430070；3. 湖北洪山实验室, 武汉 430070

关键词：胞内劳森菌,单克隆抗体,阻断ELISA,重组MltA蛋白

基金：国家生猪技术创新中心先导科技项目(NCTIP-XD/B11)

本研究旨在建立一种检测胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)抗体的阻断ELISA方法。采用原核表达的胞内劳森菌重组MltA蛋白免疫小鼠，制备获得单克隆抗体，通过Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定了单克隆抗体的特异性。以重组蛋白MltA为包被抗原，待检血清为一抗，建立了检测胞内劳森菌抗体的阻断ELISA方法。确定了阻断ELISA方法最佳反应条件，并对方法的灵敏度、特异性、重复性及符合率进行分析。结果显示: 所建立方法的灵敏度和特异性分析显示在胞内劳森菌阳性血清稀释度为1∶4时仍可稳定检出阳性，且与猪流行性腹泻病毒、伪狂犬病病毒及大肠杆菌阳性血清无交叉反应；重复性试验结果显示，批内重复试验的变异系数为1.4%~9.3%，批间重复试验的变异系数为1.0%~9.6%；与IFA结果对比，本研究所建立方法的敏感性为95.91%，特异性为80.65%，总符合率为85.92%。本研究对胞内劳森菌外膜蛋白MltA进行原核表达和纯化，制备了针对MltA的单克隆抗体，建立了一种检测胞内劳森菌抗体的阻断ELISA方法，可用于猪增生性肠病的临床诊断。

来源：2025年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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