畜牧兽医学报

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:11-1985/S

国际刊号:0366-6964

畜牧兽医学报杂志2025年第11期:鸡滑液囊支原体FtsZ蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

发布日期:

作者:宋鸿燕, 陈富友, 贾晨宇, 黄煜洲, 赖钰芳, 周琦, 黄立栋, 陈吉龙, 李训良

单位:福建农林大学动物科学学院, 福建省畜禽病原感染与免疫学重点实验室, 福州 350002

关键词:滑液囊支原体,间接ELISA,细胞分裂蛋白,抗体检测

基金:福建农林大学校科技创新基金(KFB23105A);校科技创新基金(KFB23094;KFB24013A);2024年福建省“科技特派团队服务重点产业链专项”(2024N0075)

滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae, MS) 是一种重要的禽类病原体,其丝状温度敏感蛋白FtsZ (filamentous temperature-sensitive protein Z) 具有良好的免疫原性。本研究旨在基于MS-FJ01株的FtsZ基因,建立一种特异性高、重复性好的间接ELISA抗体检测方法。根据GenBank中MS-FJ01菌株的FtsZ基因序列设计特异性引物,构建重组表达质粒pET-28a-FtsZ,利用大肠杆菌原核表达系统表达并纯化FtsZ蛋白。以20 μg·mL-1的纯化蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件和检测步骤,建立基于FtsZ蛋白的MS间接ELISA抗体检测方法,评价其特异性、重复性及临床适用性。结果显示,该方法表现出良好的特异性,仅与MS阳性血清发生特异性反应,对鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum, MG)、新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)、禽流感病毒(avian flu virus, AIV)H9亚型、大肠杆菌及沙门菌阳性血清均无交叉反应。阴阳性临界值设定为S/P≥0.498(${\bar x}$+3*s,${\bar x}$=0.132,s=0.122)。批内和批间变异系数为1.32%~4.78%和2.81%~4.72%,表明重复性良好;与IDEXX试剂盒相比,阳性符合率为82.1%,阴性符合率为95.8%,总符合率为82%。本研究成功建立了一种基于FtsZ蛋白的间接ELISA抗体检测方法,具有高特异性、稳定性及操作简便的特点,为MS感染的快速诊断和流行病学监测提供了高效、经济的技术手段。

来源:2025年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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