畜牧兽医学报

作者：郭森, 李慧昕, 韩宗玺, 孙军峰, 夏长友

单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 动物疫病防控全国重点实验室 禽呼吸道传染病创新团队, 实验动物与比较医学创新团队, 哈尔滨 150069

关键词：禽传染性支气管炎病毒,S1亚基,中和表位,IgYFc片段,免疫原性

基金：国家自然科学基金(U23A20236)

为构建禽传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白的免疫原，本研究通过比对已公布的S1中和表位和当前我国流行的GI-19型代表毒株ck/CH/LDL/091022(LDL091022)S1蛋白氨基酸序列，鉴定第22—100和410—492位氨基酸区域为中和表位优势区，分别命名为B1和B2。构建表达LDL091022 B1和B2的质粒以及在C端融合鸡IgY Fc片段的质粒，通过Western blot和IFA检测发现融合IgY Fc片段后能够显著提高蛋白的表达量。转染Expi 293F细胞表达并纯化获得了融合IgY Fc片段的重组蛋白B1-Fc和B2-Fc。通过Western blot和ELISA鉴定B1-Fc和B2-Fc与LDL091022血清的反应性，结果发现B2-Fc与血清的反应性明显优于B1-Fc。将质粒pCAGGS-B2-Fc和重组蛋白B2-Fc免疫SPF鸡，通过ELISA和IFA检测血清中的抗体水平，结果显示B2-Fc加强免疫后能够有效诱导针对B2表位的抗体，且IFA结果显示血清能与LDL091022-S1蛋白和B2-Fc发生特异性反应。进一步利用中和试验检测血清中和效价为16。上述结果表明，本研究制备的IBV S1蛋白中和表位-Fc融合蛋白具有良好的表达水平和免疫原性，能够诱导机体产生一定水平的中和抗体，为进一步研发新型IBV亚单位疫苗提供了借鉴。

来源：2025年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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