畜牧兽医学报

作者：熊曜宇, 刘丹, 高建帅, 李慧彤, 张博源, 丁家波, 蒋卉, 范学政, 沈青春

单位：1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方), 北京 100193；2. 甘肃农业大学动物科学技术学院, 兰州 730070

关键词：禽传染性支气管炎,N蛋白,质控样品,核酸检测,装甲RNA

基金：重大外来动物疫病阻断与防控技术研发项目(2022YFD1800500)

旨在研制可应用于传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus, IBV)核酸检测的质控品。本研究选取IBV较为保守的N蛋白基因作为目标靶序列，将其与MS2噬菌体衣壳蛋白基因、包装位点序列等克隆到载体pET-28a(+)中，经诱导表达和纯化，获得内部包含有IBV的N蛋白基因序列RNA的类病毒颗粒，用电镜观察其物理特征，数字PCR对拷贝数进行精确定量，使用现行国家标准GB/T23197—2022中的实时荧光定量RT-PCR方法对纯化后的装甲RNA进行了检测验证，对RNase酶抵御能力以及保存稳定性也进行了检验。综上，本研究成功构建、表达组装出了包含IBV N基因的装甲RNA，耐RNase酶的降解，可在37℃下可稳定保存15 d以上。制备的装甲RNA具备成为IBV阳性质控品的潜力，可实现对该RNA病毒检测全过程的质控。

来源：2025年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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