畜牧兽医学报

作者：王鑫雨, 李佳妮, 薄惠文, 马琛琛, 武文娟, 于永乐, 杨海燕, 马清霞, 张传美

单位：1. 青岛农业大学动物医学院, 青岛 266109；2. 青岛巴特菲科技发展有限公司, 青岛 266114

关键词：猪圆环病毒,荧光定量PCR,Cap基因,遗传进化分析

基金：山东省重点研发计划项目：跨区域科技合作(对口支援)项目(23-1-3-11-zyyd-nsh)

旨在建立一种快速简便、可同时检测猪圆环病毒(porcine circovirus, PCV)2型、3型和4型三种病原的三重荧光定量PCR检测方法，并应用建立的方法对临床疑似感染PCV的样本进行PCV2、PCV3及PCV4的检测和分子流行病学分析。根据PCV2及PCV3的Rep蛋白(replicase protein, Rep)基因序列、PCV4的Cap蛋白(capsid protein, Cap)基因序列，设计合成3对特异性引物和3种不同荧光基团标记的TaqMan探针，进行反应体系和反应条件的优化，构建阳性质粒及标准曲线，评价方法的特异性、敏感性和重复性。结果表明，建立的PCV三重荧光定量PCR检测方法特异性强，不同亚型PCV和常见猪病原体均无交叉反应；检测下限均为1.0×102 copies·μL-1，批内和批间变异系数均小于2.0%，重复性良好。对检测为阳性的样品进行Cap蛋白基因序列扩增、克隆和测序，获得41条序列，其中11条PCV2a，8条PCV2b，15条PCV2d及7条PCV3a。34条PCV2 Cap蛋白相似性为96.7%~99.7%，7条PCV3 Cap蛋白相似性为97.2%~99.9%。本试验成功建立了一种PCV三重荧光定量PCR，且可检测出不同基因型的猪圆环病毒的混合感染，PCV2d、PCV3a当前依然为国内优势基因型，为临床PCV的准确诊断提供了更快速更精准的检测方法。

来源：2025年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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