畜牧兽医学报

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:11-1985/S

国际刊号:0366-6964

畜牧兽医学报杂志2025年第11期:猪支气管败血波氏杆菌、副猪格拉瑟菌和猪链球菌TaqMan三重荧光定量PCR方法的建立与初步应用

发布日期:

作者:刘汉元, 王梓浩, 赵梦菲, 黄茜, 王斐, 华琳, 吴斌, 彭忠

单位:1. 华中农业大学动物医学院 生猪健康养殖协同创新中心, 武汉 430070;2. 湖北洪山实验室, 武汉 430070

关键词:猪支气管败血波氏杆菌,副猪格拉瑟菌,猪链球菌,多重荧光定量PCR

基金:国家重点研发计划(2024YFD1800505);湖北省自然科学基金(2023AFA094)

本研究旨在建立一种可快速同时诊断猪支气管败血波氏杆菌(Bordetela bronchiseptica,Bb)、副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)和猪链球菌(Streptococcus suis,SS)的多重荧光定量PCR方法。根据Bb的fla基因,GPS的infB基因,SS的gdh基因保守序列设计特异性引物和探针,经过反应条件优化后,建立一种检测三种病原的TaqMan多重荧光定量PCR方法。结果表明,该方法对胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、伪狂犬病病毒、猪源肺炎克雷伯菌、猪肺源大肠杆菌等病原核酸检测未出现阳性,具有良好的特异性;对三种标准质粒品的最低检测下限分别为8.06、7.11和7.15 copies·μL-1,具有较高敏感性;组内和组间变异系数均小于2%,具有良好的稳定性。对2023—2025年收集的513份临床猪肺脏样品进行检测,结果显示,Bb与GPS混合感染的比例为6.63%;Bb与SS混合感染的比例为8.11%;GPS与SS混合感染比例为12.47%;三种病原混合感染的比例为5.46%;所有混合感染的总比例为16.57%。所建立的多重荧光定量PCR方法具有较好的特异性、敏感性和稳定性,可作为临床上三种病原的快速诊断工具。

来源:2025年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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