畜牧兽医学报

作者：宋湘怡, 曹行, 刘武军, 蒋琳

单位：1. 新疆农业大学动物科学学院，乌鲁木齐 834000；2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193

关键词：miR-376c-5p,PIK3CA,脂肪沉积

基金：天山英才计划(2023TSYCLJ0017)；自治区羊产业技术体系(XJARS-09-04)

旨在通过探究miR-376c-5p与PIK3CA的靶向关系，揭示miR-376c-5p对3T3-L1前体脂肪细胞分化的影响, 探索与脂肪分化相关的miR-376c-5p在脂肪生长分化过程中的作用及可能的调控机制。本课题组前期挑选了相同饲养条件下健康的6只3岁巴什拜羊(大尾型)和6只野生盘羊×巴什拜羊F2代绵羊(小尾型)收集其尾部脂肪组织，通过对尾部脂肪的测序数据分析结果，筛选出差异表达的miR-376c-5p。并构建miR-376c-5p mimic过表达载体进行转染，通过qPCR检测PIK3CA、成脂分化标志基因的表达情况；结合油红O染色和bodipy染色检测成脂能力。分析miR-376c-5p在不同物种中的保守性，利用生物信息学软件预测miR-376c-5p的靶基因PIK3CA及其之间的结合位点和双荧光素酶报告试验验证miR-376c-5p与PIK3CA之间的靶向关系。与mimic NC组相比，过表达miR-376c-5p后，qPCR结果显示分化成脂标志基因(PPARγ、ADIPOQ、ACACA、FASN)的mRNA表达水平均极显著下调(P＜0.001)，油红O和Bodipy结果均显示，过表达miR-376c-5p后，脂滴生成减少，说明过表达miR-376c-5p抑制了3T3-L1前体脂肪细胞的成脂分化。通过预测发现miR-376c-5p与PIK3CA 3′UTR区存在结合位点，双荧光素酶报告基因分析显示，过表达miR-376c-5p显著抑制了含有PIK3CA 3′UTR片段载体的荧光活性(P＜0.05);过表达miR376c-5p也会显著抑制候选靶基因PIK3CA mRNA的表达量(P＜0.05)。以上结果说明miR-376c-5p可能通过靶向PIK3CA抑制脂肪生成，研究结果为miRNA在分子水平上的研究提供了一定的理论依据。

来源：2025年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2025年第10期