国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:何思琦, 陈倩, 蒋琳, 马月辉, 周胜花, 赵倩君
单位:1. 山西农业大学动物科学学院,太谷 030801;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193
关键词:METTL14,转录组测序,骨骼肌卫星细胞,绵羊,细胞分化
基金:国家自然科学基金面上项目(32172701);国家绒毛用羊产业技术体系项目(CARS-39-01);宁夏回族自治区自然科学基金(2023AAC02077)
旨在探究甲基转移酶样14(methyltransferase-like 14,METTL14)影响绵羊骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,SMSCs)成肌分化的分子机制,为解析METTL14调控绵羊骨骼肌卫星细胞分化的分子机制提供理论基础。本研究对SMSCs进行分离并鉴定,将METTL14过表达质粒及对照质粒分别转染进入SMSCs,通过RT-qPCR和Western blot检测其过表达效率及METTL14影响SMSCs分化的功能。对SMSCs过表达METTL14组(OE-14)和对照组(OE-NC)进行转录组测序,以P<0.05且log2|Fold Change|>1为阈值鉴定差异表达基因,进行GO和KEGG富集分析及PPI蛋白质网络互作分析。METTL14过表达能够显著增加SMSCs中METTL14的表达及成肌分化相关基因(MyHC、MyoG)的mRNA和蛋白水平,表明METTL14过表达成功,且METTL14能够促进SMSCs的分化。两组中共鉴定到259个差异表达基因,与OE-NC相比,OE-14共有45个基因表达上调,214个基因表达下调。差异基因主要富集到细胞核通路、Rap1信号通路等。PPI蛋白质网络互作分析筛选出8个枢纽基因(Degree≥15), 包括MX1、RSAD2、IFIH1、DDX58、HERC5、ISG15、MX2以及IRF7。本研究表明METTL14通过影响细胞进程和肌肉发育相关的基因和信号通路促进绵羊骨骼肌卫星细胞的分化。
来源:2025年第10期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部