国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:田姣, 龙菊烟, 陈霞, 岑晓丽, 牛熙, 黄世会, 王嘉福, 冉雪琴
单位:1. 贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院 山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室, 贵阳 550025;2. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025
关键词:ENTPD1,3'UTR,SINE,基因表达,香猪
基金:国家自然科学基金(32360810;31960641);贵州省农委项目([HQDPPI-2022]);贵州省科技创新人才团队项目(黔科合平台人才[2019]5615)
旨在探究香猪ENTPD1基因3'UTR短散在元件(short interspersed nuclear element, SINE)插入/缺失的群体多态性及对基因表达的影响。本研究以香猪为研究对象,以大白猪为对照,利用PCR技术检测香猪和大白猪群体中ENTPD1基因3'UTR区SINE插入/缺失的群体多态性;利用UCSC、SINE Base、miRNA Base、PITA及RBP suite等数据库及软件分析SINE序列中的功能元件;利用Real-time fluorescence quantitative PCR(RT-qPCR)技术检测6月龄健康香猪不同组织(心、肝、脾、肺、肾)ENTPD1的mRNA水平和不同基因型个体肺组织ENTPD1的mRNA水平,利用Western blotting技术检测不同基因型个体肺组织ENTPD1的蛋白水平。结果显示,香猪ENTPD1 3'UTR存在一个297 bp的SINE多态位点,位于终止密码子下游466 bp后,生物信息学分析发现,该SINE属于Pre0_SS tRNA家族,含有RNA聚合酶Ⅲ启动子、多个RNA结合蛋白和miRNA的结合位点;在香猪和大白猪群体中均检测出3种基因型,即插入(SINE+/+)、缺失(SINE-/-)和杂合(SINE+/-),香猪群体中缺失(SINE-/-)基因型频率极显著高于大白猪(P < 0.01),SINE-等位基因频率显著高于大白猪(P < 0.05),SINE插入/缺失在两个群体中均呈现中度多态性,但仅在香猪群体中符合Hardy-Weinberg平衡。香猪不同组织ENTPD1 mRNA检测显示脾、肺组织中mRNA水平较高。香猪不同基因型肺组织ENTPD1的mRNA和蛋白检测显示,SINE-/-、SINE+/-基因型的mRNA水平极显著高于SINE+/+,SINE-/-基因型蛋白水平极显著高于SINE+/-、SINE+/+。研究结果提示,SINE插入负调控ENTPD1基因的表达。
来源:2025年第9期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部