畜牧兽医学报

作者：王聪亮, 万仕成, 陈文博, 李剑南, 宋岩峰, 杜晓敏, 刘王叶, 李荣荣, 雷安民, 屈雷, 朱海鲸, 华进联

单位：1. 西北农林科技大学动物医学院 陕西省干细胞工程技术研究中心, 杨凌 712100；2. 榆林学院陕西省绒山羊工程技术研究中心, 榆林 719000；3. 榆林现代农业科技示范区管理委员会, 榆林 719000

关键词：BLOC1S1,过表达,山羊,布鲁氏菌,生物安全

基金：国家自然科学基金(32072806；32372970)；国家重点研发计划(2022YFD1302201)；陕西省畜牧科技示范和畜牧专项项目(20221086；20230978)；陕西省教育厅重大项目(22JY075)；陕西省农业攻关核心技术(2024NYGG005-6)；西北农林科技大学横向课题(2022HX144；H2023060246)

旨在制备BLOC1S1基因过表达山羊，并探究其生物安全性，为抗布鲁氏菌病模型建立和转基因动物遗传育种提供研究模型与平台。本研究以5只经产、健康雌性陕北白绒山羊(2~3岁)为供体进行超数排卵，公羊本交后经输卵管冲胚获得原核胚，通过显微注射系统将BLOC1S1慢病毒浓缩液注射至原核胚透明带间隙后继续培养待其发育至2细胞，再移植至15只经产陕北白绒山羊受体(2~3岁)输卵管内；产羔后，利用PCR、实时荧光定量PCR和Western blotting技术对F0代羔羊进行BLOC1S1基因过表达山羊鉴定，对BLOC1S1基因过表达与野生型山羊的血液生理生化、体重和体高等生长性状指标监测比较。结果显示，原核胚胎显微注射后移植共获得13只羔羊，经PCR检测鉴定，7只为阳性BLOC1S1基因过表达山羊，阳性率为53.8%；qRT-PCR结果显示，BLOC1S1基因在大脑(P < 0.01)、脾脏(P < 0.001)和肺脏(P < 0.05)组织mRNA表达量均显著上调，脾脏组织蛋白水平表达量显著上调(P < 0.001)；与野生型山羊相比，BLOC1S1基因过表达山羊WBC、Neu等血液生理指标和TBIL、GLU等血液生化指标均无显著差异(P>0.05)；生长发育速度监测分析结果显示，BLOC1S1基因过表达与野生型山羊初生重、1~6月龄体重和3~6月龄生长性状指标相比无显著差异(P>0.05)。本研究成功生产了BLOC1S1基因过表达山羊，且基因过表达山羊的生长发育、血液生理生化指标与野生型山羊相比无显著差异，进一步为抗布鲁氏菌病模型建立和生物安全评价体系提供理论依据。

来源：2025年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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