畜牧兽医学报

作者：杨文哲, 王锦浩, 赵子琛, 赵彤, 潘飞龙, 陈芳芳, 邵雯琪, 刘克祥, 赵树臣, 赵立佳

单位：1. 东北农业大学动物医学学院, 哈尔滨 150030；2. 黑龙江省教育厅普通疾病防治重点实验室, 哈尔滨 150030

关键词：铁死亡,姜黄素,脂多糖,牛乳腺上皮细胞(MAC-T)

基金：黑龙江省自然科学基金优秀青年基金项目(YQ2022C018)

本研究旨在从铁死亡途径探究姜黄素(curcumin, Cur)对脂多糖(LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎性反应的影响。将处于对数生长期的MAC-T细胞按照试验要求随机分组并进行相应的处理，每组3个重复。采用MTT法测定不同浓度的LPS/Cur对MAC-T细胞存活率的影响；RT-PCR法检测炎症相关基因(TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、CXCL2、CCL2)与铁死亡相关基因(PTGS2、SLC7A11、GPX4、FTH1、ACSL4)的转录水平；BODIPY 581/591 C11染色检测细胞脂质过氧化水平；试剂盒检测细胞中MDA含量、LPO浓度、GSH含量、GSH/GSSG比值；Ferro-Orange染色和Fe2+检测试剂盒测定细胞中Fe2+含量；ELISA试剂盒检测细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β浓度；Western blot检测GPX4、ACSL4、TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白的相对表达水平。结果显示，与CON组相比，10 μg·mL-1 LPS或20 μmol·L-1 Cur处理对MAC-T细胞存活率无显著影响。LPS处理后细胞中促炎相关基因(TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、CXCL2、CCL2)、促铁死亡相关基因(PTGS2、ACSL4)以及相关蛋白(ACSL4)的表达水平极显著升高(P＜0.01)；抗铁死亡相关基因(SLC7A11、GPX4、FTH1)和蛋白(GPX4)的表达水平极显著下降(P＜0.01)；MDA含量和LPO浓度均极显著升高(P＜0.01)；GSH含量和GSH/GSSG比值均极显著下降(P＜0.01)；Fe2+含量极显著升高(P＜0.01)；TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度和蛋白的表达水平均极显著升高(P＜0.01)。与LPS单独处理组相比，LPS与Cur-H共处理组促炎相关基因、促铁死亡相关基因以及相关蛋白的表达水平极显著下降(P＜0.01)；抗铁死亡相关基因和蛋白的表达水平极显著升高(P＜0.01)；脂质过氧化水平、MDA含量和LPO浓度均极显著下降(P＜0.01)；GSH含量和GSH/GSSG比值均极显著升高(P＜0.01)；Fe2+含量极显著下降(P＜0.01)；TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度和蛋白的表达水平均极显著下降(P＜0.01)。此外，铁死亡激活剂Erastin显著抑制了Cur对LPS诱导炎症的缓解作用。综上所述，Cur可通过抑制铁死亡缓解LPS诱导的MAC-T细胞炎性反应。

来源：2025年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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