畜牧兽医学报

作者：李伉, 陈思颍, 孙雅雯, 冷璇, 王栋, 崔凯, 庞云渭

单位：1. 青岛农业大学动物科技学院, 青岛 266109；2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193

关键词：甜菜碱,猪,胚胎,孤雌激活,m6A修饰

基金：国家重点研发计划(2021YFD1200301)

旨在探究甜菜碱对猪孤雌激活胚胎体外发育能力的影响。本研究于屠宰场采集猪离体卵巢，在实验室抽取卵丘-卵母细胞复合体，经体外成熟、孤雌激活后，在添加不同浓度甜菜碱(0、0.25、0.5、1.0 mmol·L-1)的培养液中进行体外培养，48 h统计卵裂率，168 h统计囊胚率，筛选最佳添加浓度；利用Hoechst 33342染色统计囊胚细胞数，实时荧光定量PCR检测囊胚全能性基因(OCT4、NANOG和SOX2)表达水平；检测囊胚活性氧(reactive oxygen species, ROS)和谷胱甘肽(glutathione, GSH)水平；利用免疫荧光染色检测2-cell期、4-cell期、8-cell期、桑椹胚期和囊胚期各阶段胚胎的m6A水平，并检测囊胚m6A甲基化转移酶及m6A去甲基化转移酶相关基因表达水平。各组试验均至少重复3次。结果表明，0.25和0.5 mmol·L-1甜菜碱处理组孤雌激活囊胚率显著高于对照组和1.0 mmol·L-1处理组(P < 0.05)，其中0.5 mmol·L-1组最高。与对照组相比，0.5 mmol·L-1组囊胚细胞数极显著增加(P < 0.01)，全能性基因OCT4、NANOG和SOX2的mRNA表达显著上调(P < 0.05)，囊胚ROS水平极显著降低(P < 0.01)，GSH水平极其显著增加(P < 0.000 1)；0.5 mmol·L-1组8-cell期、桑椹胚期和囊胚期胚胎的m6A修饰水平和m6A甲基化转移酶相关基因(WTAP、METTL3和METT14)的表达水平显著高于对照组(P < 0.05)，但m6A去甲基化转移酶相关基因(ALKBH5和FTO)的表达无显著变化。综上所述，在体外培养基中添加0.5 mmol·L-1甜菜碱通过增强胚胎抗氧化能力、上调m6A修饰水平，显著提高猪孤雌激活胚胎体外发育能力并改善胚胎质量。

来源：2025年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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