畜牧兽医学报

作者：韩银, 谢紫葳, 严舒可, 徐飞, 陈瑞爱

单位：1. 华南农业大学兽医学院, 广州 510642；2. 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心, 肇庆 526238；3. 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司, 肇庆 526238；4. 肇庆大华农生物药品有限公司, 肇庆 526238

关键词：新城疫病毒,NP,HSP70蛋白,免疫共沉淀技术

基金：广东省重点领域研发计划项目(2021B0707010009)；岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心自主立项项目(P20211154-0301)

新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)强毒株引起的一种急性接触性传染病，临床上常导致呼吸系统和消化系统的临床症状，NDV的广泛流行给家禽养殖业造成了巨大经济损失。NP(nucleocapsid)是NDV的一种核衣壳蛋白，在病毒复制、介导免疫应答和引发细胞自噬方面具有重要作用，其是否存在其他相互作用的宿主蛋白尚不清楚。为了筛选与NDV NP互作的宿主蛋白，初步探索互作宿主蛋白对NDV复制的影响，为NDV抗病药物新靶点的筛选提供理论基础。利用真核表达载体pXJ40成功构建了NDV NP的真核表达质粒，通过免疫共沉淀、质谱分析、GST-pull down以及激光共聚焦等技术筛选出能与NP相互作用的宿主蛋白，进一步在DF-1细胞中通过敲低、过表达等方法探究互作宿主蛋白对NDV复制的影响。质谱结果筛选到与NP发生相互作用的潜在蛋白211个，对差异蛋白进行富集分析揭示了其可能发挥的生物学功能和参与的生物学过程，进一步验证了热休克蛋白家族成员70(HSP70)与NP相互作用，并且这种互作是由HSP70的SBD结构域介导的；NDV感染能下调宿主细胞内HSP70的表达；过表达HSP70能在蛋白和转录水平显著抑制病毒复制；敲低内源性HSP70和HSP70抑制剂均能显著促进NDV复制。本研究筛选出NDV NP的互作宿主蛋白HSP70，并且验证了过表达HSP70能显著抑制NDV复制，作为NDV感染的负调控因子，为设计以HSP70为靶点的抗病毒药物提供了新思路。

来源：2025年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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