畜牧兽医学报

作者：刘峰, 李坤, 章兴赜, 马雪青, 孙普, 李凤娟, 曹轶梅, 白兴文, 付元芳, 袁红, 欧阳一凡, 刘在新, 卢曾军, 李平花

单位：1. 中国农业科学院兰州兽医研究所, 兰州大学动物医学与生物安全学院, 动物疫病防控全国重点实验室, 兰州 730000；2. 甘肃省病原生物学基础学科研究中心, 兰州 730046

关键词：口蹄疫病毒,IgA抗体,构建表达,抗病毒活性

基金：“十四五”国家重点研发计划项目(2021YFD1800304)

口蹄疫是口蹄疫病毒引起危害猪、牛和羊等主要家畜的一种烈性传染病，为了发展抗口蹄疫病毒的新策略，进行疾病的综合防控，本研究将O型、A型口蹄疫病毒特异性猪BCR文库中筛选获得的5株O型和A型口蹄疫病毒共有克隆型IgA抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)序列分别与猪IgA的重链恒定区基因和轻链(Kappa链)恒定区基因拼接，分别构建5个IgA的重链载体质粒和5个轻链载体质粒，并将其分别共转染CHO-S悬浮细胞，转染7 d后收集上清进行蛋白纯化。纯化后的抗体用SDS-PAGE和Western blot鉴定、并用微量病毒中和试验分析5株IgA抗体中和O型、A型口蹄疫病毒的能力，用间接ELISA方法检测5株IgA抗体与口蹄疫病毒的反应性。结果表明：本研究成功构建质粒并表达了5株抗口蹄疫病毒的IgA抗体，这些抗体对O型和A型口蹄疫病毒均无中和活性，但其中1株抗体(POA-A8)与口蹄疫病毒特异性结合的能力最强，可以用于未来口蹄疫病毒诊断检测方法的建立。本研究为未来抗口蹄疫病毒非中和的分泌型IgA的研究以及病毒诊断方法的建立奠定了基础。

来源：2025年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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