畜牧兽医学报

作者：朱怡萱, 谷鹏飞, 赵奇, 徐盼盼, 范迎赛, 包永占, 王霄, 史万玉

单位：河北农业大学中兽医学院，保定 071000

关键词：丹参多糖,Mn2+,PLGA,佐剂,细胞免疫,体液免疫

基金：国家自然科学基金资助项目(32402932; 32302914)；河北省省级科技计划资助: 河北省中央引导地方科技发展资金项目(246Z6606G)；河北农业大学引进人才科研专项(YJ2023037)

本研究利用PLGA包封了免疫刺激效果强和生物安全性良好的丹参多糖和Mn2+，评价了该体系作为灭活PCV2佐剂的免疫增强效果。首先我们利用复乳溶剂挥发法制备了共载丹参多糖和Mn2+的PLGA纳米佐剂递送系统(SM-PLGA)，将SM-PLGA与PCV2抗原混合，对小鼠左右大腿皮下分别注射100 μL进行初免，同时设立空白对照组、PCV2组、Alhydrogel (Algel)-PCV2组、丹参多糖-PLGA组、SM组、丹参多糖组和PLGA组，免疫后的第14天对小鼠进行加强免疫。初免后的第5天通过流式细胞术评估腘淋巴结和腹股沟淋巴结中DCs的活化情况。在初免后的第21、28、35、42天收集小鼠血清，对PCV2特异性抗体IgG、IgG1、IgG2a进行动态监测，评价佐剂对PCV2特异性体液免疫反应的增强效果。在初免后的第21、28天采集小鼠脾脏淋巴细胞，分别对CD4+T细胞、CD8+T细胞、细胞毒性T细胞、记忆性T细胞和生发中心B细胞活化情况进行测定，并对第28天细胞上清中IFN-β、IFN-γ、IL-6进行测定。最后，在初免后的第35天采集小鼠淋巴结，测定生发中心B细胞的活化情况。通过上述不同时段的测定结果，评价SM-PLGA对机体免疫反应的增强效果。由结果可知SM-PLGA在初免后的第5天可以极显著促进淋巴结DCs的活化，在初免后第21~42天可以持续刺激PCV2特异性抗体IgG及其亚型的分泌。在初免后第21天SM-PLGA可显著促进脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD8+T细胞中CTL应答，并在初免后第28和35天仍对记忆性T细胞和生发中心B细胞有较强的刺激作用，同时极显著促进相关细胞因子IFN-β、IFN-γ、IL-6的分泌。结果表明SM-PLGA作为灭活PCV2的佐剂，可以诱导强效的Th1/Th2免疫应答，为PCV2的预防提供参考。

来源：2025年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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