畜牧兽医学报

作者：何印娣, 石正旺, 石鑫泰, 陈婕, 廖焕程, 张帆, 罗俊聪, 朱昱茜, 席韬, 李帅鹏, 王川, 田宏, 郑海学

单位：1. 甘肃农业大学动物医学院, 兰州 730070；2. 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室, 兰州 730000

关键词：羊痘病毒,122蛋白,多克隆抗体,胶体金试纸条

基金：甘肃省科技重大专项课题(22ZD6NA001)；中央高校基本科研业务费专项资金资助(学科交叉创新团队建设项目)(lzujbky-2022-ct02)；农业部科技创新2030-重大项目(2023ZD0404301)；中国农业科学院创新计划(CAAS-CSLPDCP-2023002)；“十四五”广东省揭榜挂帅项目(2023SDZG02)；2022甘肃省创新联合体项目(22ZD6NA012)

旨在建立一种快速、简便、特异、灵敏的羊痘病毒抗体的通用型胶体金检测方法。通过原核表达、纯化获得羊痘病毒122重组蛋白，并制备122蛋白多克隆抗体。将122蛋白与胶体金偶联，作为金标抗原，再将122蛋白及兔多克隆抗体包被在硝酸纤维素膜(NC)上，分别作为检测线(T线)和质控线(C线)，经条件优化，研制成检测羊痘病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条。结果表明，成功获得122重组蛋白，大小约为32 ku，胶体金试纸条可在12 min特异性检测到羊痘病毒抗体；与其他常见家畜疫病病原阳性血清无交叉反应；检测绵羊痘病毒、牛结节性皮肤病病毒和山羊痘病毒阳性血清的灵敏度分别为1 ∶64、1 ∶128和1 ∶128，与市售羊痘抗体间接ELISA诊断试剂盒(效价1 ∶128、1 ∶256和1 ∶256)的敏感性相当；对130份临床血清样品的检测与商品化试剂盒检测结果进行比较，两者的kappa值为0.93，为高度一致。本研究成功研制了羊痘病毒抗体通用型胶体金免疫层析试纸条，具有较高的敏感性和特异性，且具有成本低、检测快速、操作简便、结果容易判断等特点，对羊痘现场检测具有实际应用价值。

来源：2025年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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