畜牧兽医学报

作者：韦钰诗, 孙文, 庞晓敏, 王玉莲

单位：国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)，武汉 430070

关键词：肺炎克雷伯菌,替加环素,耐药机制,外排泵,孔蛋白,调控因子

基金：国家重点研发计划项目(2022YFD1800404-04)

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae，CRKP)的报道逐年增多，替加环素已成为治疗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的最后一道防线，本研究旨在对3株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的替加环素耐药性机制进行初步研究。采用微量肉汤稀释法测定对替加环素的敏感性并评估外排泵抑制剂(PAβN)对耐药性的影响；结合前期全基因组测序结果，采用PCR验证与替加环素耐药相关基因及其调控因子、孔蛋白相关基因的转录[acrAB-tolC、oqxAB、msbA、kexD、kdeA、kpnEF、kpnGH、Ompk37、OmpA、ramA、ramR、marA、rarA、acrR、tet(X4)、tetA]，通过实时荧光定量PCR检测耐药菌株和敏感菌株之间的基因转录水平差异。结果显示：体外药敏试验发现3株肺炎克雷伯菌KP30535、KP30845和KP30727分别对替加环素耐药、中介、敏感。外源添加PAβN增加了菌株对替加环素的敏感性。实时荧光定量PCR结果表明，耐药菌株(KP30535)和中介菌株(KP30845)中acrAB、kpnGH、ramA转录水平显著(P < 0.05)高于对照菌ATCC13883，KP30535中kpnE转录水平显著(P < 0.01)高于对照菌；KP30727中acrB、ramA、ramR转录水平显著(P < 0.05)高于对照菌；3株菌中孔蛋白Ompk37、OmpA转录水平极显著(P < 0.001)低于对照菌。Spearman相关性分析表明，acrAB、kpnGH和kexD和孔蛋白OmpA与菌株替加环素耐药表型相关($|r|$ ≥0.6)。综上，acrAB、kpnGH、kexD和孔蛋白OmpA的差异表达是影响本研究中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对替加环素耐药性的重要因素，为后续更深入地研究提供参考依据。

来源：2025年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2025年第7期