畜牧兽医学报

作者：瑞雪, 张云航, 李杨, 谭晨, 蔡艺菲, 刘园园, 曹宗喜, 张艳, 孙瑞萍, 刘光亮

单位：1. 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室，海口 571100；2. 新疆农业大学 动物医学学院，乌鲁木齐 830000；3. 中国农业科学院兰州兽医研究所 动物疫病防控 全国重点实验室，兰州 730030

关键词：猪内源性逆转录病毒,囊膜基因,三重PCR检测方法,组织样品

基金：科技部重点研发计划前沿生物技术专项课题(2021YFA0805905)；海南省重大科技计划项目(ZDKJ2021030)；国家重点研发计划课题(2023YFC3404302)

本研究旨在建立可同时检测猪基因组中的猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus，PERV)并鉴别PERV-A、PERV-B、PERV-C三种亚型PERV的三重PCR检测方法。根据PERV不同亚型囊膜(env)基因设计特异性引物，经反应条件和反应体系优化后对该方法进行特异性、敏感性及重复性试验验证。结果表明：本研究建立的三重PCR检测方法特异性强，可特异性扩增三种亚型PERV目的基因，对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒扩增结果呈阴性；该方法的敏感性较好，对PERV-A、PERV-B、PERV-C质粒标准品的检测下限分别为1×102、1×103和1×102拷贝·μL-1；采用建立的三重PCR方法检测103份组织样品，其中PERV-A的阳性率为100%(103/103)，PERV-B的阳性率为100%(103/103)，PERV-C的阳性率为54%(56/103)，与经典单重PCR方法进行比较，符合率分别为100%、100%、96.6%。本研究成功建立了一种特异性强、敏感性较好、快速简便的三重PCR方法，可用于PERV三种亚型同时检测的鉴别诊断，为筛选无PERV的猪源供体器官提供技术支撑。

来源：2025年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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