畜牧兽医学报

作者：邓俊花, 李昊轩, 陈冬杰, 吕继洲, 王晶晶, 张舟, 袁向芬, 魏方, 吴绍强

单位：1. 中国检验检疫科学研究院，北京 100176；2. 国家市场监督管理总局技术创新中心(动植物产品质量与安全)，北京 100176

关键词：非洲猪瘟病毒,DNA假病毒,定量

基金：国家重点研发技术项目(2022YFD1800605)

本研究旨在研制一种全程质控非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测、避免质粒交叉污染的DNA假病毒。将ASFV B646L/CD2v/MGF505-1R/MGF360-12L 4种检测关键基因及EGFP基因共构建于杆状病毒的转移载体pFastBacTM Dual中，转化形成重组Bacmid pFastBac-EGFP-ASFV，转染至sf21细胞，包装产生ASFV重组杆状病毒。结果显示：通过荧光倒置显微镜观察，表达的EGFP蛋白绿色荧光信号指示成功获取AcMNPV-EGFP-ASFV病毒；重组杆状病毒基因组溯源分析，ASFV B646L/CD2v/MGF505-1R/MGF360-12L基因序列满足现行检测方法质控需求；ASFV质控品均匀、稳定，-20 ℃保存至少可稳定24个月。采用ddPCR定量为4.09×103 copies·μL-1。本研究非洲猪瘟病毒DNA假病毒的制备，为非洲猪瘟疫情监测提供了新的技术支撑。

来源：2025年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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