畜牧兽医学报

作者：柳思奇, 杨榛, 杨雅楠, 蔡原, 赵生国

单位：甘肃农业大学动物科学与技术学院, 兰州 730070

关键词：藏猪,AdipoR2,脂肪细胞,AMPK,产热

基金：国家自然科学基金(32060730)；甘肃省陇原青年英才(2023142)；甘肃省农业科技项目(GNKJ-2023-27)

旨在探究干扰Adiopr2基因对藏猪皮下腹股沟脂肪细胞产热的影响，揭示AdiopR2-AMPK通路活性对脂质合成和ATP生成影响的分子机制。本研究采集20日龄冬季藏猪(TW组，平均环境温度-15℃)、夏季藏猪(TS组，平均环境温度25℃)和夏季长白猪(LS组，平均环境温度25℃)的皮下腹股沟脂肪组织，每组5头。Adipor2的小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)用于转录后沉默Adipor2的表达。采用实时荧光定量聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)检测脂肪组织中脂联素受体基因、siRNA-AdipoR2的干扰效率、以及AMPK下游信号、脂质合成相关基因、产热相关基因和线粒体复合物Ⅰ-Ⅲ基因的mRNA水平，细胞计数试剂盒(cell counting kit-8，CCK-8)分析藏猪脂肪细胞的增殖能力，蛋白印迹(Western blot，WB)方法检测AMPK及其下游信号的表达，油红O染色用于检测藏猪脂肪细胞的脂质沉积能力，JC-1线粒体膜电位和ATP生成试剂盒检测藏猪脂肪细胞的产热。结果表明：在体内，长期冷暴露下藏猪皮下腹股沟脂肪组织Adipor1/2表达显著升高(P < 0.01或P < 0.000 1)；在体外，藏猪诱导成熟脂肪细胞的第4、8、12天Adipor2的表达显著高于长白猪，Adipor1的表达显著低于长白猪(P < 0.01或P < 0.000 1)。siRNA-AdipoR2显著抑制了Adipor2的表达，促进脂质合成基因Fasn的表达，抑制产热基因(Dio2和Cidea)和线粒体复合物Ⅰ Ndufa的表达(P < 0.05，P < 0.001或P < 0.000 1)。此外，干扰Adipor2后48 h时细胞扩增效率显著降低，显著抑制AMPK的磷酸化，促进脂质沉积(P < 0.05，P < 0.01或P < 0.001)。JC-1聚合物线粒体膜电位和ATP生成分析发现，siRNA-AdipoR2显著抑制线粒体膜电位和ATP生成(P < 0.01或P < 0.001)。本研究结果显示，干扰Adipor2能够抑制AMPK信号，促进脂质沉积并抑制藏猪脂肪细胞的产热作用，为探究藏猪独特的耐寒机制提供分子依据和理论基础。

来源：2025年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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