畜牧兽医学报

作者：张曼琪, 赵冰雨, 温如如, 张静雯, 孙孟冉, 占乐杨, 苟婧萱, 宋祥军

单位：安徽农业大学, 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室, 合肥 230036

关键词：抗生素替代,Ⅵ型分泌系统,Tse1,金黄色葡萄球菌

基金：2024年国家级大学生创新创业训练计划项目(X202310364031)；2023年安徽农业大学校级大学生创新创业训练计划项目(X202310364040)

Ⅵ型分泌系统(type Ⅵ secretion systems，T6SS)广泛存在于革兰阴性菌中，其效应蛋白Tse1在细菌种间竞争中发挥着重要的作用。本研究旨在探究Tse1对金黄色葡萄球菌(Staphylococcu saureus，S.aureus)的抑菌作用，探索其在耐药性细菌中的表现和影响。利用含有重组质粒pET-28a-Tse1的大肠杆菌原核表达系统诱导Tse1蛋白表达并纯化。通过荧光显微镜及扫描电镜观察重组蛋白Tse1对金黄色葡萄球菌细胞壁的破坏作用。最后，采用琼脂孔扩散抑菌试验、微量肉汤稀释法测定重组蛋白Tse1对金黄色葡萄球菌的抗菌活性及其与抗生素联合作用的效果。结果表明，在16℃，IPTG浓度为0.5 mmol·L-1诱导16 h时，Tse1蛋白的表达量达到最高并以可溶性形式存在于上清液中，蛋白相对分子质量约为22 ku。重组蛋白Tse1与S.aureus共培后可发现蛋白结合在菌体表面并能破坏其细胞壁，破坏程度表现为剂量依赖形式。琼脂孔扩散抑菌试验表明重组蛋白Tse1对S.aureus不同菌株均有明显抑菌作用，并且与青霉素(PG)联合使用能明显提升Tse1蛋白的抑菌效果。本试验建立了Tse1蛋白的原核表达及纯化方法，证明了Tse1蛋白对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用，与青霉素联合应用能增强其抑菌效果，为挖掘新型抗生素替代品提供了相关理论基础。

来源：2025年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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