畜牧兽医学报

作者：康慧杰, 沙季辰, 杨天元, 张云彤, 侯晓昱, 李思瑶, 王维千, 侯庆典, 张帅, 杨昊天, 赵元, 范宏刚

单位：1. 东北农业大学动物医学学院, 哈尔滨 150030；2. 黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院, 齐齐哈尔 161005

关键词：犬骨肉瘤,新藤黄酸,糖原,恶性生物学行为

基金：国家自然青年科学基金(32302948)；中国博士后科学基金(2024M750389)

本研究基于肿瘤细胞糖原代谢途径探究新藤黄酸(gambogenic acid，GNA)抑制犬骨肉瘤(osteosarcoma，OS)细胞恶性生物学行为的作用及机制。选用Mckinely犬OS细胞系，通过CCK-8试验确定GNA的给药剂量；通过平板克隆试验探究GNA对犬OS细胞增殖的抑制作用；通过划痕愈合试验、Transwell试验及Western blot试验探究GNA对犬OS细胞迁移及侵袭的抑制作用；通过糖原代谢物试剂盒、酶活力试剂盒、RT-PCR及Western blot试验探究GNA对犬OS糖原代谢途径的影响。通过CCK-8试验确定了后续细胞试验所需剂量，低剂量(0.24 μmol·L-1)、中剂量(0.28 μmol·L-1)及高剂量(0.32 μmol·L-1)；细胞恶性生物学行为相关试验结果表明，GNA呈剂量依赖性地显著抑制犬OS的增殖、迁移及侵袭行为(P < 0.05)；Western blot试验结果表明，GNA呈剂量依赖性地显著抑制Vimentin、MMP-9及Snail蛋白表达(P < 0.05)；糖原代谢检测结果表明，GNA能显著促进犬OS细胞葡萄糖的摄取及细胞内糖原含量的增加，并显著抑制GPa的酶活力；RT-PCR结果显示，GNA显著促进犬OS细胞GLUT1表达(P < 0.05)，但对犬OS细胞HK2及PYGL的表达均无显著影响(P>0.05)；Western blot试验结果与RT-PCR结果基本一致；细胞免疫荧光检测结果表明，GNA能抑制PYGL入核，且PYGL的平均荧光强度随GNA浓度升高而逐渐降低(P < 0.05)。GNA能抑制Mckinely犬OS细胞的增殖、迁移与侵袭且与PYGL所介导的糖原分解途径被抑制相关。

来源：2025年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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