畜牧兽医学报

作者：高正婕, 罗萍, 李博成, 王水莲

单位：湖南农业大学动物医学院 动物生殖健康与调控实验室, 长沙 090401

关键词：GnIH,颗粒细胞,增殖,凋亡,雌激素分泌

基金：国家自然科学基金(31672507)；湖南省自然科学基金项目(2020JJ4359)；湖南农业大学双一流建设项目(SYL201802017)

旨在探究GnIH对小鼠颗粒细胞增殖、凋亡以及雌激素分泌水平的影响。本研究选取健康的21~23 d雌性ICR小鼠，分离小鼠卵巢GCs，利用FSHR进行鉴定，并采用qRT-PCR对小鼠颗粒细胞中GnIH和GnIH-R基因进行检测。构建pshRNA-1, 2, 3, 4干扰质粒载体和pLV-GnIH过表达质粒载体对GnIH基因分别进行干扰和过表达(GnIH干扰组分为：pshNC组和pshRNA1~4组，GnIH过表达组分为：PLV-NC组和PLV-GnIH组)。采用慢病毒滴度检测和qRT-PCR方法检测干扰和过表达效率，利用MTT法检测干扰和过表达GnIH后小鼠颗粒细胞增殖变化情况，采用Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测小鼠卵巢颗粒细胞的凋亡情况，并采用ELISA检测GCs培养液上清中孕酮和雌二醇的分泌水平，以上结果均重复3次。结果发现，在转染48 h和96 h时pshRNA-1, 2, 3, 4均能够极显著地干扰GnIH的表达(P＜0.01)，而在72 h时只有pshRNA-4能够极显著地下调GnIH的表达(P＜0.01)；72 h时pLV-GnIH能够极显著上调GnIH的表达(P＜0.001)。过表达GnIH后颗粒细胞增殖活力极显著下调(P＜0.001)，且能促进细胞凋亡(P＜0.001)，极显著抑制小鼠颗粒细胞雌激素的分泌(P＜0.001)。而转染pshRNA-2, 4 72 h和96 h时则极显著上调颗粒细胞增殖活力(P＜0.1)和雌激素的分泌(P＜0.05)，且显著抑制颗粒细胞凋亡(P＜0.05和P＜0.01)。本研究发现，GnIH能够抑制小鼠卵巢颗粒细胞增殖，促进颗粒细胞凋亡，降低雌激素的分泌水平。

来源：2025年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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