畜牧兽医学报

作者：胡米, 沈瑶歆, 范宝超, 孙敏, 周金柱, 郭容利, 李彬

单位：1. 江苏省农业科学院兽医研究所，南京 210014；2. 江苏大学食品与生物工程学院，镇江 212000

关键词：猪流行性腹泻病毒,灭活疫苗,纳米载体,金属有机框架,口服递送

基金：江苏省农业科技自主创新资金(CX(23)3076)；国家重点研发计划(2022YFD1800801)

本研究旨在对制备的Eudragit L100修饰的铝锰双金属有机框架纳米粒作为灭活猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)口服递送载体进行评价。利用金属离子Al3+、Mn2+和2-氨基对苯二甲酸有机配体之间的配位作用，将灭活PEDV原位封装Al/Mn-MOF中, 得到Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒。通过静电相互作用，将阴离子聚合物Eudragit L100结合于Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒表面，得到L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒。采用扫描电子显微镜考察其形态、纳米粒度电位仪测定表面电势、傅里叶红外光谱仪分析组成成分、X射线衍射仪测定晶格结构。采用ELISA和抗原检测卡表征对灭活PEDV的负载效率。配制模拟胃液考察L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒的稳定性，并用ELISA测定灭活PEDV的释放率。使用激光共聚焦观察巨噬细胞对Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒的摄取。采用CCK8法测定不同浓度的纳米粒的细胞毒性。采用ELISA试剂盒测定Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒对巨噬细胞分泌免疫调节因子的影响。结果表明，L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒成功制备，尺寸小于1 μm。在PEDV/金属离子/有机配体投料比为0.42 ∶1 ∶1时，对灭活PEDV的负载率可达到99.6%。L100@Al/Mn-MOF@PEDV在模拟胃液中孵育2 h仍具有高稳定性，对灭活PEDV的释放率仅为12.73%左右。在小鼠RAW264.7细胞的摄取试验中，用激光共聚焦观察到细胞对Al/Mn-MOF@PEDV摄取情况优于未经负载的灭活PEDV。且Al/Mn-MOF@PEDV能够显著增强RAW264.7细胞中Th1型因子IFN-γ和Th2型因子IL-4的表达。本研究为PED灭活疫苗口服载体的设计提供了新思路，并为后续应用于动物免疫的研究奠定基础。

来源：2025年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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