国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:吴琼, 李凌丹, 袁辉, 宾晨, 邓可, 李伟, 叶十一, 李国攀, 沈青春, 熊涛
单位:1. 长江大学生命科学学院,荆州 434025;2. 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,杭州 310021;3. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193
关键词:猪α干扰素,原核表达,突变,生物信息学分析,抗病毒活性
基金:兽医生物技术国家重点实验室开放课题资助青年基金(SKLVBF202002)
猪α干扰素(PoIFN-α)可用于治疗和预防病毒感染,但天然猪α干扰素抗病毒活性低,寻找高生物活性的突变体序列对猪传染性疾病的防治措施研究具有重要意义。运用生物信息学方法分析和比对PoIFN-α的各亚型氨基酸序列,对天然PoIFN-α序列的八个位点进行定点突变构建PoIFN-α 8s突变体并进行原核表达纯化;获得重组蛋白后在PK-15细胞上针对水疱性口炎病毒(VSV)进行活性测定,同时在小鼠体内验证PoIFN-α 8s突变体对猪伪狂犬病病毒(PRV)的抑制能力。结果发现,重组PoIFN-α 8s测得抗病毒活性为1.13×107 IU·mg-1,对比PoIFN-α产品,PoIFN-α 8s可降低PK-15细胞上VSV的病毒滴度和基因拷贝数达10倍以上,具有更高的体外抑制VSV增殖能力;动物试验表明,PoIFN-α 8s可降低感染PRV小鼠体内各器官的病毒载量。综上,本研究成功构建高效的PoIFN-α 8s突变体,并验证了其良好的体内外抗病毒活性。
来源:2025年第5期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部