畜牧兽医学报

作者：龚宇轩, 黑伟, 鲍武, 陈佳仪, 李萌, 郭晓红, 李步高

单位：山西农业大学动物科学学院, 太谷 030801

关键词：TMEM182,肌肉特异性,骨骼肌卫星细胞,增殖,成肌分化

基金：国家自然科学基金面上项目(32272846)；山西省重点研发计划项目(202102140601005)

旨在探究TMEM182对猪骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的调控作用。本研究选取饲养在相同条件下马身猪和大白猪各3头(180日龄，健康去势公猪)，采集各组织；选取1周龄仔猪分离猪骨骼肌卫星细胞；通过qRT-PCR检测TMEM182在猪不同组织的表达谱、在不同猪种肌肉组织中的表达差异以及在骨骼肌卫星细胞不同分化天数的时序表达模式；通过在卫星细胞过表达TMEM182(OE-TMEM182)和干扰TMEM182 (si-TMEM182)，采用qRT-PCR检测增殖标志基因的表达变化，采用EdU试验检测EdU阳性细胞数量变化；诱导猪骨骼肌卫星细胞成肌分化后，通过qRT-PCR、Wstern blot、免疫荧光染色等技术检测成肌分化关键基因mRNA和蛋白的表达水平以及对肌管融合的影响。结果显示，TMEM182在猪肌肉组织中均高表达，在其他组织中几乎不表达；与马身猪相比，TMEM182在大白猪肌肉组织中表达量更高(P < 0.05)；随着卫星细胞分化天数的增加，TMEM182的表达量在分化第4天和5天时上升，分化第6天时下降，在分化第0天时表达量最低，第7天时表达量最高(P < 0.05)；互作蛋白结果显示，OE-TMEM182组CDH15、TMEM25、HS3ST1、SEC11A的表达量极显著降低(P＜0.01)，VWC2L的表达量显著降低(P＜0.05)；在细胞增殖过程中，过表达TMEM182后极显著下调CDK1、PCNA、Ki67的表达(P < 0.01)，且EdU阳性细胞数极显著减少(P < 0.01)。干扰TMEM182后极显著上调CDK4、CDK1(P < 0.01)，显著上调Ki67的表达(P < 0.05)，且EdU阳性细胞数极显著增加(P < 0.01)。在成肌分化过程中，过表达TMEM182后，MyoG、MyHC表达量极显著降低(P < 0.01)，MyoD表达量显著降低(P < 0.05)；干扰TMEM182后，MyoD、MyoG、MyHC的表达量极显著上升(P < 0.01)，Myf5的表达量显著上升(P < 0.05)；同时，TMEM182可能通过抑制PI3K-Akt信号通路调控猪卫星细胞的增殖和分化。本研究结果表明，TMEM182为猪骨骼肌卫星细胞增殖及分化过程中的一个负调控因子，推测其为猪骨骼肌生长发育的一个关键候选基因。

来源：2025年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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