畜牧兽医学报

作者：曹丽艳, 孔祥雨, 袁聪, 段月月, 马国祥, 施磊, 张宇, 万颖, 李想通, 王娅婷, 杜煜, 郑海学, 王琦

单位：1. 中国农业科学院都市农业研究所, 成都 610213；2. 中国农业科学院兰州兽医研究所, 兰州 730030

关键词：猪急性腹泻综合征冠状病毒,N蛋白,6E8单克隆抗体,表位鉴定

基金：四川省科技计划项目(重点研发项目，2022YFN0008)；四川省杰青项目(21JCQN0175)；中国农业科学院青年英才项目(王琦)；中国农业科学院创新工程(ASTIP2024-34-IUA-07)

猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)是一种蝙蝠来源的新型猪肠道冠状病毒，可引起新生仔猪腹泻、呕吐、脱水而死亡。SADS-CoV核衣壳蛋白(N)是病毒复制中最保守的结构蛋白，具有良好的抗原性。前期研究获得的5株抗SADS-CoV N蛋白的单克隆抗体(1C10、4B10、6G1、6F3和6E8)，其中6E8与SADS-CoV的反应性最强。在本研究中，利用pET32a作为表达载体构建N蛋白的截短及缺失突变体质粒，经诱导表达后，用6E8进行抗原抗体反应。Western blot结果表明，6E8识别的抗原表位为69-QKGQRK-74。同源性分析结果显示，该表位在不同SADS-CoV毒株和蝙蝠冠状病毒HKU2中完全一致；在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猫感染性腹膜炎病毒(FIPV)中发现相似的表位(VKGQRK)，仅有一个氨基酸的差异；而在其他冠状病毒中同源性较低。特异性试验中，6E8不能与猪流行性腹泻冠状病毒(PEDV)和TGEV发生发应，尽管6E8识别表位与TGEV仅有一个氨基酸的差异，这说明69-Q是6E8识别表位的关键氨基酸。进一步试验发现，当6E8与SADS-CoV孵育后再感染Huh7细胞，能增强SADS-CoV的感染，出现抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement, ADE)现象。总之，SADS-CoV N蛋白新型B细胞表位的鉴定，将为设计SADS-CoV新型疫苗和开发表位相关的诊断试剂提供新的见解。

来源：2025年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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