畜牧兽医学报

作者：邱谦, 桑锐, 王巍, 刘馨蔓, 于明弘, 刘晓童, 于天, 张雪梅

单位：延边大学农学院, 延吉 133002

关键词：中药复方呼宁散,鸡肺源大肠杆菌,抑菌活性,抗炎,抗氧化

基金：吉林省自然科学基金(自由探索重点项目，YDZJ202401430ZYTS)；国家自然科学基金(32360900；32060817)

本试验旨在研究中药复方呼宁散对鸡肺源大肠杆菌的抑菌活性，以及对脂多糖(LPS)诱导的鸡胚成纤维细胞(DF-1)损伤模型的抗炎和抗氧化作用。以桑白皮、黄芩、蒲公英、甘草等10味中药制备中药复方呼宁散，牛津杯法测定呼宁散对鸡肺源大肠杆菌的抑菌效果，TTC法测定其最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)，绘制细菌生长曲线，检测细菌培养液中碱性磷酸酶(AKP)、核酸和可溶性蛋白的含量。CCK-8法检测LPS和呼宁散对DF-1细胞的毒性，建立LPS诱导的DF-1细胞损伤模型并给药，ELISA法测定炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8的含量，Western blot法测定TLR4/NF-κB信号通路中Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB p65(NF-κB p65)关键蛋白表达量，相关试剂盒测定细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)活性，Western blot法测定Keap1/Nrf2信号通路中Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)和核因子E2相关因子2(Nrf2)关键蛋白表达量。结果显示：鸡肺源大肠杆菌对呼宁散呈中度敏感，且MIC为250 mg·mL-1，MBC为500 mg·mL-1；呼宁散可抑制鸡肺源大肠杆菌的生长，提高细菌培养液中AKP、可溶性蛋白和核酸含量。在细胞试验中，呼宁散可降低LPS诱导的DF-1细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8的含量，抑制TLR4、NF-κB p65蛋白的过度表达；呼宁散可降低LPS诱导的DF-1细胞ROS和MDA的含量，提高SOD活性和GSH含量，进一步提高Nrf2、NQO1、HO-1蛋白的表达量，抑制Keap1蛋白的过度表达。中药复方呼宁散对鸡肺源大肠杆菌具有良好的抑菌活性，并且可通过调控TLR4/NF-κB和Keap1/Nrf2信号通路关键蛋白的表达对LPS诱导的DF-1细胞损伤发挥抗炎和抗氧化作用。

来源：2025年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2025年第4期