畜牧兽医学报

作者：杨宇婷, 陈国梁, 常巧宁, 鲍武, 刘靖超, 姬梦婷, 荣晓音, 郭晓红, 杨阳, 李步高

单位：山西农业大学动物科学学院, 太谷 030801

关键词：猪,脂肪细胞分化,miR-375-3p,Fam229a

基金：国家自然科学基金面上项目(32272846)；山西省重点研发计划项目(202102140601005)；山西省基础研究计划(202403021211043)

旨在探究miR-375-3p对猪脂肪细胞生成的调控作用及靶向Fam229a的作用机制。本研究选取了饲养在相同条件下的10头30日龄的健康无病的公猪为研究对象，通过实时荧光定量PCR技术(qPCR)检测miR-375-3p在心脏、肝脏、脾脏等组织的表达分布及在脂肪细胞成脂诱导分化不同时期的表达水平；利用miRNA mimic和miRNA inhibitor过表达和干扰miR-375-3p，qPCR检测miR-375-3p对成脂关键基因CEBPα、PPARγ、FABP4表达的影响，油红O染色和统计分析检测成脂能力；通过生物信息学分析和双荧光素酶报告试验预测并鉴定miR-375-3p的下游靶标Fam229a，并对Fam229a进行功能验证；最后利用PSIPRED软件、Phyre2.0软件和STRING网站预测Fam229a下游功能及qPCR检测Fam229a对早期成脂关键基因CEBPα、CEBPβ、ZFP423和ZFP521表达的影响；上述试验方法均设立3个生物学重复。结果表明，miR-375-3p在猪各组织中广泛表达，在肺脏和肾周脂肪中相对表达量较高；时序表达谱显示，在猪原代前体脂肪细胞的分化过程中miR-375-3p的表达量呈先下降后上升趋势；过表达miR-375-3p后，猪原代前体脂肪细胞的脂滴明显增多，脂肪细胞分化标志基因CEBPα、PPARγ和FABP4的mRNA水平极显著上升(P < 0.01)，干扰miR-375-3p后，结果相反。为了探究miR-375-3p的作用机制，通过qRT-RCR、结合位点预测以及双荧光素酶试验发现了miR-375-3p与Fam229a之间存在结合作用，过表达miR-375-3p能显著抑制Fam229a的表达(P＜0.05)，干扰后则表示相反结果。组织表达谱显示Fam229a在肝脏和肾周脂肪中相对表达量较高；时序表达谱显示，在猪原代前体脂肪细胞的分化过程中，Fam229a的表达量呈先上升后下降再上升趋势；过表达Fam229a后，脂滴明显减少，脂肪细胞分化标志基因CEBPα、PPARγ的mRNA水平显著降低(P < 0.05)，干扰Fam229a后，结果相反；通过qRT-RCR技术和生物信息学预测了Fam229a调控成脂分化的下游机制。本研究结果表明，miR-375-3p能够促进猪原代前体脂肪细胞的成脂分化，其靶基因Fam229a抑制成脂分化，揭示了miR-375-3p靶向Fam229a调控成脂分化的机制，丰富了miRNA的分子调控网络。

来源：2025年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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