畜牧兽医学报

作者：闫炎, 刘晏辰, 王仲发, 李旻娟, 何玉楠, 关伟军, 姜运良

单位：1. 山东农业大学动物科技学院, 泰安 271000；2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193

关键词：卵黄囊,间充质干细胞,洛岛红鸡,生物学特性,分化潜能

基金：国家重点研发计划(2021YFD1300100；2021YFD1200303)

旨在体外获得并培养洛岛红鸡卵黄囊间充质干细胞(chicken yolk sac mesenchymal stem cell，cYS-MSCs)，检测其体外增殖能力和生物学特性。本研究选取已孵化12天的健康洛岛红鸡受精蛋的卵黄囊进行组织贴壁培养，选择第5代cYS-MSCs进行免疫荧光和RT-PCR检测表面标记基因；选择第3代、第9代和第15代cYS-MSCs，每代次设置3个重复，绘制生长曲线、计算群体倍增时间和克隆形成率；通过核型分析检测遗传稳定性；选择第9代cYS-MSCs进行成脂、成软骨和成骨诱导，通过特异性染色和RT-PCR检测多向分化能力。结果，分离培养的细胞为长梭形，呈漩涡状或平行式生长；免疫荧光结果显示CD29、CD73、CD90和CD166呈阳性表达，而造血干细胞标记基因CD34和泛白细胞标记基因CD45不表达；RT-PCR结果显示CD29、CD44、CD73、CD90和CD166表达，而CD34和CD45不表达；cYS-MSCs呈“S”型增长，且第3代的群体倍增时间极显著低于第9代(P＜0.001)，第9代群体倍增时间极显著低于第15代(P＜0.001)，第3代的克隆形成率极显著高于第9代(P＜0.001)，第9代极显著高于第15代(P＜0.001)；染色体核型分析结果显示经过连续传代的cYS-MSCs染色体数量、形态正常(2n=78，zz)；诱导分化的cYS-MSCs，特异性染色和RT-PCR结果显示cYS-MSCs可被成功诱导分化为成脂肪细胞、成软骨细胞和成骨细胞。综上，本研究成功从鸡胚卵黄囊中分离获得MSCs，且能在体外培养增殖，并且分离的cYS-MSCs具有MSCs的生物学特性和多向分化潜能，其多向分化潜能预示细胞移植的前景，可为洛岛红鸡种质资源保存提供依据和潜在可利用资源。

来源：2025年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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