国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:马晓莉, 李段, 曾道平, 刘燕玲, 王晓敏, 彭国良, 宋长绪, 王磊, 徐铮
单位:1. 华南农业大学实验动物中心/动物科学学院/猪禽种业全国重点实验室/国家生猪种业工程技术研究中心, 广州 510642;2. 韶关学院英东生物与农业学院, 韶关 512005;3. 温氏食品集团股份有限公司/广东标允生物科技有限公司, 云浮 527400
关键词:非洲猪瘟病毒,p72,化学发光酶免疫,抗体检测
基金:国家重点研发计划(2021YFD2001205);广东省基础与应用基础研究基金(2023A1515010234)
抗体检测对于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染诊断和疫苗研究至关重要,因此建立一种基于ASFV p72蛋白抗体的全自动化学发光酶免疫分析方法(chemiluminescent enzyme immunoassay,CLEIA)具有重要意义。本研究以重组p72蛋白偶联的磁微粒(magnetic particles,MPs)捕获p72蛋白抗体,再结合碱性磷酸酶(alkaline phosphates, AP)标记的p72蛋白,借助全自动化学发光分析仪,分析猪血清中p72蛋白特异性抗体水平。经反应条件优化,建立了一种ASFV p72蛋白抗体全自动化学发光酶免疫检测方法。结果显示,建立的CLEIA阴性、阳性临界值为9.505 U·mL-1,诊断特异性和灵敏性分别为98.33% 和100%,与其他猪病原阳性血清无交叉反应,批内和批间变异系数分别小于5% 和10%,各种试剂组分可以保存6个月以上,对ASFV阳性标准血清,分析敏感性为1∶12 800,与国产商品化试剂盒的总符合率达95.90%。综上,本研究建立的化学发光方法具有高灵敏性和可重复性,有自动化检测、操作步骤简单的优势,可为ASFV的检测提供新的技术支持。
来源:2025年第3期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部