畜牧兽医学报

作者：张正雨, 杨培鸿, 郭宏, 李新, 张林林, 郭益文, 胡德宝, 丁向彬

单位：天津农学院动物科学与动物医学学院 天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室, 天津 300384

关键词：Sirt1,牛骨骼肌卫星细胞,细胞增殖,成肌分化

基金：天津市“131”创新型人才培养工程第一层次人选资助项目

旨在探讨沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 2-related enzyme1, Sirt1)对牛骨骼肌卫星细胞(bovine skeletal muscle satellite cells, BSMSCs)增殖和成肌分化的影响。在本试验中，将小片段干扰RNA(siRNA)和靶向Sirt1的过表达质粒转染入从3~4月龄胎牛臀腿肌剥离的原代卫星细胞中，在增殖和分化阶段的特定时间点收集RNA和蛋白质样品，每个处理设计3个生物学重复，使用实时定量PCR(qRT-PCR)以及蛋白质印记法(Western blotting)进行分析。此外，还进行了EdU染色试验以评估细胞的增殖情况。结果显示：在细胞分化期，40倍显微镜下观察，发现Sirt1敲低导致肌管的数量、长度和直径显著增加。qRT-PCR和Western blotting证实，与对照组相比，分化标志物肌球蛋白重链(myosin heavy chains, MyHC)和肌细胞生成素(myogenin, MyoG)的mRNA水平显著上调(P < 0.01)，MyoG的蛋白表达水平也显著升高(P < 0.05)。相反，Sirt1过表达导致肌管的数量、长度和直径显著减少。Western blotting显示Sirt1过表达组MyoG表达量显著低于对照组(P < 0.01)。在BSMSCs增殖期，qRT-PCR、Western blotting和EdU检测表明，Sirt1敲低和过表达对细胞增殖均无显著影响(P>0.05)。综上所述，Sirt1敲减可有效促进细胞分化，而过表达可抑制该过程，但对增殖均无明显影响。这些发现证实了Sirt1是作为调控BSMSCs成肌分化的重要因素，在协调成肌细胞分化和促进肌管形成中起关键作用。

来源：2025年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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