畜牧兽医学报

作者：王涛, 王麒, 董娇娇, 王德贺, 李兰会

单位：1. 河北农业大学动物科技学院, 保定 071000；2. 河北省畜牧兽医研究所, 保定 071001

关键词：鸡,PRLR,SPEF2,双向启动子,甲基化

基金：河北省自然科学基金(C2021204087)

旨在揭示鸡催乳素受体基因(PRLR)和精子鞭毛蛋白2基因(SPEF2)在鸡胚性腺的双向转录调控特征。采集4个胚龄(E12.5、E16.5、E18.5、E21.5)180只大午金凤鸡胚左右侧性腺，每3个样品混池组成1个重复，除E21.5母鸡右侧卵巢完全退化，其他同胚龄同性别同侧性腺共14分组，利用RT-qPCR检测PRLR和SPEF2的表达变化。利用cDNA末端快速扩增技术(5'RACE)和双荧光素酶报告基因系统(DLRA)分别鉴定PRLR和SPEF2的转录起始位点(TSS)及其核心启动子区，利用亚硫酸氢盐测序技术(BSP)检测启动子区甲基化水平。结果发现，PRLR在E12.5~E21.5睾丸中的表达显著高于卵巢(P<0.05)，而SPEF2在E18.5~E21.5卵巢中的表达显著高于睾丸(P<0.05)。PRLR的10个TSS中5个具有启动子活性，SPEF2的3个TSS全部具有启动子活性。PRLR的PA1启动子和SPEF2的SC启动子活性最高(P<0.05)，进一步检测发现二者的最高活性区域分别是长565 bp和478 bp的反向互补双向启动子区。478 bp的双向启动活性显著高于565 bp(P<0.05)，且二者对PRLR的启动活性均显著高于SPEF2(P<0.05)，这与E12.5~E21.5鸡胚性腺中PRLR的转录表达显著高于SPEF2(P<0.05)一致。E21.5卵巢双向启动子区443 bp的CpG岛甲基化水平显著高于睾丸(P<0.05)，与睾丸PRLR表达显著高于卵巢一致；位于SPEF2第1内含子区159 bp的CpG岛甲基化水平睾丸显著高于卵巢(P<0.05)，与睾丸SPEF2的表达显著低于卵巢一致。综上，478 bp的双向核心启动子区调控鸡胚性腺中PRLR和SPEF2的转录表达，并且启动PRLR的转录活性高于SPEF2，PRLR的转录表达水平高于SPEF2；甲基化参与双向启动子调控性腺PRLR的转录表达，E21.5卵巢甲基化水平高，PRLR在卵巢表达低于睾丸。这些研究结果为揭示PRLR和SPEF2在鸡胚性腺发育中的转录调控机制研究提供理论依据。

来源：2025年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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