畜牧兽医学报

作者：于江玮, 程慧敏, 林健, 杨宝琳, 黄程, 杨志远, 胡格

单位：1. 北京农学院动物科学技术学院, 北京 102206；2. 北京市农林科学院畜牧兽医研究所, 北京 100097

关键词：鸭瘟病毒,US6基因,TaqMan探针,荧光定量PCR,增殖规律,人工感染

基金：北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX20220422)；现代农业产业技术体系北京市家禽创新团队(BAIC06-2024)

为建立一种鸭瘟病毒(duck plague virus, DPV)TaqMan荧光定量PCR快速检测方法，基于DPV US6基因保守序列设计特异性引物和探针，构建重组质粒DPV-US6标准品，对方法敏感性、特异性和重复性进行评价，并应用于DPV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖及人工感染鸭器官组织上分布规律研究。结果显示，成功建立了DPV TaqMan荧光定量PCR检测方法，该方法最低检测限可以达到10 copies·μL-1，与番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鸭坦布苏病毒、鸭呼肠孤病毒、H9N2亚型禽流感病毒、鸭甲型肝炎病毒(Ⅰ型和Ⅲ型)和鸭衣原体均无交叉反应，批间和批内变异系数均小于2.0%。DPV-AX株感染CEF细胞后，病毒核酸拷贝数检测结果表明，4~8 h病毒增殖缓慢，12~60 h迅速上升，60 h达到最高峰，72~144 h逐渐下降，与TCID50法测定的病毒滴度相比，两种检测方法具有良好相关性，可实现拷贝数替代TCID50。DPV人工感染鸭组织脏器的病毒载量分布检测表明，肝脏中的病毒载量最高。本试验建立的检测方法为研究DPV-AX株在CEF上的增殖规律提供工具。

来源：2025年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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