畜牧兽医学报

作者：刘健, 于泽海, 张玫瑜, 李丹, 王君, 刘芳琴, 张群, 徐守振

单位：青岛农业大学动物医学院, 青岛 266109

关键词：牛肠道病毒,分离鉴定,TCID50,全基因组分析,ELISA

基金：国家重点研发计划项目(2018YFD0501403)

本研究从牛肠病毒(BEV)阳性粪便中通过接种BHK细胞进行蚀斑纯化分离得到一株F型肠道病毒，经过RT-PCR鉴定正确后送生物公司进行全基因测序以及进行TCID50的测定，以MEGA11.0等生物信息学软件对BEV全基因进行分析并构建遗传进化树。以原核表达方式得到含BEV分离株VP3基因的重组蛋白，作为包被抗原，建立检测抗体的间接ELISA方法，并对建立的ELISA方法的特异性、灵敏性、重复性进行测定与用于临床样品的检测。结果显示，BEV分离株的TCID50为10-6.26·mL-1，病毒分离株全长为7 439 nt，ORF大小为6 504 bp，编码2 168个氨基酸，与F型肠道病毒BEV4遗传关系最近且核苷酸相似性最高，故分离到的病毒为F型肠道病毒，暂命名为BEV-QD，与其他F型毒株相比，BEV-QD株存在氨基酸的突变以及缺失并且大多集中在P2、P3区。本次建立的抗体检测间接ELISA方法重复性良好；阳性血清稀释1 600倍后结果仍呈现阳性，灵敏性良好；与BVDV等阳性血清不发生特异性结合，特异性良好；检测40份临床样品中，13份为阳性，阳性率为32.5%。本研究分离到一株F型牛肠病毒突变株，建立了一种抗体间接ELISA方法。为牛肠病毒的检测和防控提供了基础手段。

来源：2025年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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