畜牧兽医学报

作者：赵龙, 林静怡, 豆薇, 徐婷萱, 顾庆云, 高海慧, 李生庆, 郭抗抗

单位：1. 西北农林科技大学动物医学院, 杨凌 712100；2. 西藏职业技术学院西藏兽药重点实验室, 拉萨 850030；3. 宁夏农林科学院动物科学研究所, 银川 750002；4. 青海省畜牧兽医科学院, 西宁 810016

关键词：牛冠状病毒,核衣壳蛋白,多克隆抗体,藏药,病毒复制

基金：西藏自治区科技计划项目(XZ202101YD0001C)；宁夏回族自治区重点研发计划(2021BEF03005)；青海省科技计划项目(2022-NK-118)

本研究旨在筛选出对牛冠状病毒(BCoV)体外复制具有抑制效应的藏药。构建BCoV核衣壳(N)蛋白原核表达载体，诱导表达后将纯化的蛋白分别免疫小鼠和兔，获得鼠抗和兔抗N蛋白多克隆抗体，建立用于测定BCoV复制的Western blot和间接免疫荧光法(IFA)；水煎法获得21种候选藏药的水提物，CCK-8法测定水提物对人结直肠腺癌细胞(HCT-8)的最大安全浓度，以BCoV感染HCT-8细胞为研究对象，分别设置BCoV感染组、藏药水提物处理组、利巴韦林处理组，在BCoV感染24 h后分别应用实时荧光定量PCR、Western blot、IFA测定细胞中BCoV复制量，统计分析藏药水提物对病毒复制的抑制作用，筛选对BCoV具有显著抑制作用的藏药。结果显示：分别制备鼠抗与兔抗BCoV N蛋白多克隆抗体，建立了检测BCoV的Western blot与IFA方法；21种藏药中的15种具有显著抑制BCoV复制效应(P＜0.01)，其中青藏大戟、诃子、瑞香狼毒3种藏药对BCoV复制的抑制作用优于利巴韦林。本研究筛选到15种对BCoV体外复制具有抑制效应的藏药，其中青藏大戟、诃子、瑞香狼毒3种藏药抑制作用效果显著，为BCoV防治药物的开发奠定了基础。

来源：2025年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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