畜牧兽医学报

作者：于凤姣, 刘开东, 宋伟杰, 柳楠, 李和刚, 赵金山, 高霄霄, 贺建宁

单位：青岛农业大学动物科技学院, 青岛 266109

关键词：miR-137,MITF,黑色素细胞,黑色素生成,山羊

基金：青岛市科技惠民示范专项(24-1-8-xdny-2-nsh；23-2-8-xdny-13-nsh)；畜禽生物育种全国重点实验室开放课题(2024SKLAB6-110)；山东省农业良种工程(2021LZGC010)

旨在探讨miR-137在黑山羊被毛颜色形成中的调控作用，为研究黑色素生成的分子机制提供新的视角。本研究选取4日龄黑山羊肩后约5 cm处皮肤组织分离黑色素细胞，通过免疫组化和免疫荧光试验对黑色素细胞定位，采用多巴染色和免疫荧光的方法鉴定山羊黑色素细胞，裂解黑色素细胞测定黑色素的含量，通过细胞转染、实时荧光定量PCR、Western blot等方法探究miR-137通过靶向黑素细胞诱导转录因子(melanocyte inducing transcription factor，MITF)对黑色素细胞生成黑色素的调控机制。结果显示，在毛乳头上方及外毛根鞘处有黑色素细胞的存在，黑色素细胞呈两极或三极状，多巴染色鉴定黑色素细胞呈棕黑色阳性，免疫荧光鉴定毛色生成有关的标记基因表达阳性。转染过表达载体后的山羊黑色素细胞与NC组相比，黑色素含量降低(P < 0.05)，同时，inhibitor组趋势相反(P < 0.05)。通过RT-qPCR与Western blot对黑色素细胞生成相关基因的表达水平进行分析，结果显示，过表达或抑制miR-137对靶基因MITF的mRNA表达水平影响并不显著(P＞0.05)。而过表达miR-137对黑色素细胞生成的标志基因TYR、TYRP-1、TYRP-2的mRNA表达起抑制作用(P＜0.05)，同时，inhibitor组趋势相反(P < 0.05)。MITF的蛋白质表达水平mimic组显著低于mimic NC组(P＜0.05)，inhibitor组的蛋白质表达水平显著高于inhibitor NC组(P＜0.05)，mimic组黑色素细胞生成的标志基因TYR、TYRP-1、TYRP-2的蛋白质表达水平显著低于mimic NC组(P＜0.05)，inhibitor组高于inhibitor NC组(P＜0.05)。本研究发现，miR-137不影响MITF的mRNA表达量，而是通过靶向MITF间接抑制山羊黑色素细胞黑色素的生成，这为研究miR-137在山羊肤色和毛色形成中的作用提供了理论依据。

来源：2025年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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