畜牧兽医学报

作者：吴少强, 刘雨帆, 韦义荣, 黄艳娜, 蒋钦杨

单位：广西大学动物科学技术学院, 广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室, 南宁 530004

关键词：白藜芦醇(RES),CaN/NFAT信号通路,山羊成肌细胞,肌纤维转化

基金：国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设项目(nycytxgxcxtd-2021-09)

旨在解析白藜芦醇(resveratrol，RES)介导PROX1基因调控山羊骨骼肌肌纤维类型转化的分子机制。体内试验部分，试验选取12只180日龄去势努比亚山羊((28.25±0.26)kg)随机分为2组，每组6个重复。以补饲0、150 mg·kg-1 RES组山羊背最长肌组织为试验样品，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及Western blot技术检测PROX1基因的表达量；体外试验，基于课题组前期试验所筛选出的20 μmol·L-1 RES是细胞培养最佳浓度，通过转染PROX1干扰片段及干扰片段与20 μmol·L-1 RES共处理山羊骨骼肌成肌细胞，检测CaN/NFAT通路关键基因与肌纤维四型标志基因在mRNA水平及蛋白水平的表达情况；同时，利用蛋白-蛋白对接技术检测SIRT1与PROX1蛋白是否互作，并通过SIRT1抑制剂EX-527和RES共处理山羊成肌细胞，验证SIRT1与CaN/NFAT通路的调控关系。结果表明，与对照组相比，补饲150 mg·kg-1 RES处理山羊成肌细胞可使SIRT1基因及CaN/NFAT通路关键基因的mRNA表达量极显著上调(P < 0.001)，使MYH7蛋白的表达水平显著上调(P < 0.01)，MYH4蛋白的表达水平显著下降(P < 0.01)。而干扰PROX1基因后，CaN/NFAT通路关键基因mRNA表达水平及MYH7、MYH4基因mRNA表达水平与蛋白表达水平的表达情况都与上述相反，该情况则在干扰片段与RES共处理成肌细胞后发生改变。蛋白-蛋白对接结果表明，SIRT1蛋白与PROX1蛋白可以互作。SIRT1抑制剂处理成肌细胞后，CaN/NFAT通路关键基因(NFATc1、TNNC1、TNNI1、MYOZ2、SLN)的mRNA表达量较CON组显著下调(P < 0.01)；再经过RES干预后，TNNC1、TNNI1的mRNA表达量极显著上调(P < 0.01)。本研究初步揭示了RES通过SIRT1/PROX1/CaN/NFAT途径调控肌纤维类型转化的机制，为后续畜禽肉品质的改良提供理论依据。

来源：2025年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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