畜牧兽医学报

作者：王浩, 王世玉, 肖金龙, 沈珏, 潘天灵, 张靖松, 肖鹏, 高洪

单位：1. 云南农业大学食品科学技术学院, 昆明 650201；2. 云南农业大学动物医学院, 昆明 650201

关键词：大肠杆菌,高致病性毒力岛,耶尔森杆菌素,进化分析,TNF/NF-κB信号通路

基金：国家自然科学基金资助项目(31960692；31660704)；2021年度云南省研究生优质课程建设项目(2021YJSYZKC05)

旨在研究猪源大肠杆菌(Escherichia coli，E. coli)高致病性毒力岛(high pathogenicity island，HPI)结构基因的进化趋势及其对TNF/NF-κB通路的影响。本研究运用MEGA等软件分析HPI结构基因的遗传进化，使用R语言功能包挖掘E.coli感染细胞的基因表达综合数据库(gene expression omnibus，GEO)，并进行差异基因富集分析；使用分子对接预测HPI-Ybt与TNF/NF-κB通路相关蛋白的结合；将E. coli及前期构建的HPI缺陷株E.coliΔHPI感染IPEC-J2细胞，运用qPCR、ELISA和Western blot对TNF/NF-κB通路中的关键调控点进行检测。系统进化树分析显示，分离株YUNNAN001的intb基因与GQ891729.1亲缘关系最近，而与CQ903045.1亲缘关系较远。KEGG富集发现TNF和NF-κB通路均参与了E. coli感染，且共同基因有10个；火山图及热图富集显示，E. coli感染显著促进了TNF/NF-κB通路中PTGS2、NF-κB、TRAF6等的表达(P < 0.05)；分子对接显示，HPI-Ybt能与同属于TNF/NF-κB通路的10个蛋白相结合，其中与MAP3K14、TNFAIP3的结合最强；感染E. coli组的NF-κB、PTGS2、TNF-α、TRAF6、TRIF、ATF4、cxcl2和IL-6 mRNA水平显著高于E. coliΔHPI组(P < 0.01)，且相对于E. coliΔHPI组，E. coli组显著激活了TNF/NF-κB通路蛋白的表达；此外，与E. coliΔHPI组相比，E. coli感染显著升高了NF-κB和IL-6的水平(P < 0.01)。结果提示，E. coli-HPI通过合成Ybt结合TNF/NF-κB通路中的关键蛋白，进而激活TNF/NF-κB通路。

来源：2025年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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