畜牧兽医学报

作者：刘雅坤, 毕振威, 夏兴霞, 莫菲, 徐司雨, 钱晶, 谭业平, 诸玉梅, 赵建军

单位：1. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院, 大庆 163319；2. 江苏省农业科学院兽医研究所 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室, 南京 210014；3. 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心, 泰州 225300

关键词：犬瘟热病毒,中和活性,单链抗体,嵌合抗体

基金：国家重点研发计划项目(2022YFD1800603)

为减少和改善鼠源单克隆抗体在犬临床治疗中的异源性和功效，用RT-PCR方法从分泌抗犬瘟热病毒(CDV)中和单克隆抗体的鼠源杂交瘤细胞中扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，通过Linker将VH和VL连接获得单链抗体(scFv)基因，选择犬源抗体IgG B恒定区(Fc)连接到scFv的C末端获得犬源化嵌合单链抗体(scFv-Fc)基因；分别构建鼠源scFv与犬源化scFv-Fc的原核表达载体，通过大肠杆菌表达、纯化，用ELISA、IPMA、细胞融合抑制和中和试验检测表达抗体的特异性和中和活性。结果显示：CDV鼠源scFv、犬源化scFv-Fc的ELISA最低检出浓度分别为14.38和102.75 μg·mL-1；与表达的CDV H蛋白和CDV均发生特异性反应；能够抑制CDV H和F蛋白介导的细胞膜融合，完全保护细胞不出现病变的最低浓度分别为0.72和0.64 μg·mL-1。本研究成功制备了鼠源scFv与犬源化scFv-Fc嵌合抗体，为犬瘟热的临床治疗提供了候选抗体药物。

来源：2024年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2024年第12期