畜牧兽医学报

作者：陈晓丽, 周佳浩, 周静, 屈倩, 王志华, 熊鹰, 朱咏琪, 贾伟新, 吕伟杰, 郭世宁

单位：1. 华南农业大学兽医学院, 广州 510642；2. 华南农业大学国际中兽医研究所, 广州 510642

关键词：改良育阴方,非洲猪瘟病毒,ASFV-p72基因,CGAS-STING信号通路,LC-MS分析

基金：广东省重点领域研发计划(2019B020211004)

旨在为评价中药体外对非洲猪瘟病毒的抑制作用，本研究将5种试验用药：连翘、马勃、改良育阴方(modified Yuyin decoction, MYY)、复方鱼腥草(复方2)和银翘马勃散(复方3)，通过qPCR检测不同中药在被非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染的猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages, PAMs)中，对ASFV编码的衣壳蛋白p72的影响，筛选出可以显著降低ASFV-p72基因表达的中药为改良育阴方(MYY)。采用LC-MS分析检测出改良育阴方的主要化学成分；采用CCK8法观察改良育阴方对猪肺泡巨噬细胞(PAMs)活力的影响；荧光定量PCR检测ASFV-p72基因的表达；Western blot和ELISA检测CGAS-STING信号通路蛋白表达水平；RU.521作为cGAS抑制剂用于验证MYY在cGAS-STING通路中对ASFV的作用。结果表明，在PAMs中，MYY可以显著降低ASFV-p72基因表达，在ASFV感染2 h给药效果最佳，对ASFV感染PAMs后的细胞活力具有浓度依赖性改善作用。攻毒后2 h，使用MYY发现PAMs细胞上清液中干扰素基因刺激蛋白(STING)、TANK结合激酶1(TBK1)、干扰素调节因子3(IRF3)、干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)表达量的下降，PAMs细胞内环状GMP-AMP合成酶(cGAS)、干扰素β(IFNβ)蛋白量表达增加，MYY可激活cGAS-STING-TBK1-IRF3-IFNβ信号通路，促进IFITM3的表达。经RU.521处理后，MYY仍能提高细胞活力，降低ASFV-p72基因的表达。综上所述，MYY具有抑制ASFV的潜在作用，可能与cGAS-STING信号通路的激活促进IFITM3的表达有关。

来源：2024年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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