畜牧兽医学报

作者：钱佳豪, 刘丹, 周师众, 张博源, 高建帅, 蒋卉, 范学政, 张广智, 丁家波, 王春凤, 沈青春

单位：1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方), 北京 100193；2. 吉林农业大学动物医学院, 长春 130118

关键词：双重荧光定量RT-PCR,非洲马瘟病毒,西尼罗病毒

基金：外来动物疫病传入溯源精准诊断技术与产品研究(2022YFD1800503)

本研究旨在建立一种可同时检测非洲马瘟病毒(African horse sickness virus, AHSV)和西尼罗病毒(West Nile virus, WNV)的双重荧光定量RT-PCR检测方法。根据AHSV VP7基因序列和WNV Poly Protein基因的高度保守区域设计特异性引物和探针，优化反应条件及体系，绘制标准曲线，对其特异性、敏感性和重复性进行测定，并采用该方法对临床样品进行检测验证。结果显示：该方法能够同时检测AHSV和WNV，且特异性良好，与马动脉炎病毒、马疱疹病毒1型、马传染性贫血病毒、马腺疫链球菌、马流感病毒等马病核酸均无交叉反应；敏感性高，AHSV和WNV最低检测限均为10 copies·μL-1；组内变异系数为0.04%~0.93%，组间变异系数为0.17%~4.83%，重复性良好；使用该方法对30份马全血样品进行检测，结果均为阴性。本试验建立的检测方法对马属动物检疫、非洲马瘟和西尼罗热的监测与防控具有重要意义。

来源：2024年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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