畜牧兽医学报

作者：张唯玉, 程景, 许家宝, 王静, 陶薪燕, 李博, 张亚伟, 张丹丹, 张宁, 郝振凯, 周琛帛, 张元庆

单位：山西农业大学动物科学学院, 太谷 030801

关键词：前体脂肪细胞,SREBP1,诱导分化,RNA-Seq,PPAR

基金：山西省基础研究计划自然科学研究面上项目(20210302123424);肉牛边鸡地方特色畜禽种质资源创新及品种选育(202201140601026);山西省现代农业产业技术体系牛体系(2023CYJSTX13)

旨在探究SREBP1基因对晋南牛前体脂肪细胞分化的影响，并通过RNA-Seq技术探究该基因在晋南牛前体脂肪细胞分化过程中的调控机制。本研究利用SREBP1基因的过表达载体和siRNA转染晋南牛前体脂肪细胞，油酸诱导分化后采用油红O染色观察脂滴累积情况，检测甘油三酯(triglyceride，TG)含量以探究SREBP1基因对其分化的影响。利用RT-qPCR和蛋白免疫印迹技术(Western blotting，WB)检测过表达SREBP1基因的前体脂肪细胞中相关基因mRNA和蛋白水平变化。RNA-Seq检测干扰SREBP1基因的脂肪细胞，筛选差异表达基因(differentially expressed genes，DEGs)进行KEGG通路富集分析，并对差异表达基因进行验证，以探究SREBP1基因参与调控晋南牛前体脂肪细胞分化相关的潜在靶基因。每个处理均设置3个重复。结果表明：1)过表达SREBP1基因能够促进前体脂肪细胞内脂滴的累积、极显著提高细胞内TG含量(P < 0.01)，干扰SREBP1基因则会抑制脂滴形成。2)过表达SREBP1基因后FABP4的mRNA表达量显著升高(P < 0.05)，FABP7、LPL的表达量极显著升高(P < 0.01)，WB结果显示FABP4蛋白表达水平明显升高；3) RNA-Seq共筛选到227个DEGs，其中包括67个上调基因和160个下调基因。京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析结果表明差异基因富集到PPAR信号通路和不饱和脂肪酸生物合成等相关通路，干扰SREBP1基因后，差异表达基因FABP4、LPL和FABP7的mRNA表达量均极显著降低(P < 0.01)，FABP4的蛋白表达水平也明显降低。由此可知，SREBP1基因对于晋南牛前体脂肪细胞分化具有促进作用，过表达该基因可促进细胞内TG累积，并且极有可能是通过对与脂质分化相关的PPAR信号通路和不饱和脂肪酸生物合成通路的调控实现的。本研究结果为探究SREBP1基因在晋南牛前体脂肪细胞分化过程中的调控机制提供理论参考。

来源：2024年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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