畜牧兽医学报

作者：郭旺, 彭光众, 黄宏奥, 吴慧显, 胡序明, 张钰, 张扬, 陈国宏, 徐琪

单位：扬州大学动物科学与技术学院, 扬州 225009

关键词：marco细胞系,稳定表达,慢病毒

基金：江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(21)1001);国家自然科学基金(31602032)

旨在通过慢病毒表达系统构建稳定表达marco基因的HD11细胞系，为研究marco基因的抗病毒免疫功能提供重要工具。首先，以HD11细胞为模板，通过PCR扩增获得marco基因编码区序列，并将其克隆到慢病毒载体上，获得重组慢病毒质粒pLV3-CMV-MCS-Puro-marco；其次，利用四质粒慢病毒包装系统将重组质粒pLV3-CMV-MCS-Puro-marco与辅助质粒pLP1、pLP2、pMD2.G共转染至293T细胞进行慢病毒包装，构建含鸡marco基因的重组慢病毒。最后，用包装成功的重组慢病毒感染HD11细胞72 h后进行嘌呤霉素(2 μg·mL-1)筛选，通过RT-qPCR检测marco基因表达后最终确认获得稳定表达鸡marco基因的HD11细胞系。本研究成功构建了稳定表达鸡marco基因的HD11细胞系，为后续深入研究marco基因的功能提供了重要基础。

来源：2024年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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