畜牧兽医学报

作者：胡冰艳, 刘起昊, 曹超越, 李孟轩, 庞卫军

单位：西北农林科技大学动物科技学院 陕西省动物遗传育种与繁殖重点实验室, 杨凌 712100

关键词：猪精子,酸碱性稀释液,一水肌酸,性控精液,X、Y精子分选

基金：国家生猪产业技术体系(CARS-35-PIG);陕西省重点研发计划项目(2022ZDLNY01-04)

旨在探究调整猪精液稀释液酸碱性联合一水肌酸(ceatine monohydrate, CMH)对猪X、Y精子的分离效果。本研究使用8头2~4岁健康的杜洛克公猪采集精液，通过调整精液稀释液Beltsville(BTS)的pH，使用精子计算机辅助分析系统(CASA)检测精子活率和运动轨迹确定X、Y精子分选体系最适pH，利用CASA检测精子运动性能确定一水肌酸最适添加浓度。通过免疫荧光染色和流式细胞术评估X、Y精子分选效果，利用荧光标记法、精子活性氧MitoSOX Red染色等方法检测精子顶体、质膜完整性、活性氧含量等精子质量指标。结果表明，当稀释液pH为6.4和7.1时，孵育60 min对精子活率无显著影响(P＞0.05)，上层精子前向性运动占比极显著高于下层(P＜0.01)。稀释液中添加750 μmol·L-1一水肌酸孵育60 min时显著提高了精子活力、直线运动速率、曲线运动速率和摆动性(P＜0.05)。使用酸性稀释液联合一水肌酸分选猪X、Y精子，分选后上层精液X精子占比达63.32%；碱性稀释液联合一水肌酸分选猪X、Y精子，分选后上层精液Y精子占比达到67.19%。进一步研究发现，分选后顶体完整性、质膜完整性和ROS水平同对照组相比无显著差异(P＞0.05)，ATP水平、线粒体膜电位和运动性能显著高于对照组(P＜0.05)。综上，本研究通过调整稀释液酸碱性并联合一水肌酸建立了一种简便、价廉和快捷的猪X、Y精子分选体系，该方法不影响分选后精子质量并提高精子运动性能，进一步为猪性控精液新技术研发提供试验依据。

来源：2024年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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